内皮素-1对大鼠肝星状细胞作用的实验研究.pdfVIP

内容提要 内皮素一1对大鼠肝星状细胞作用的实验研究 研究生：吴 婷 指导教师：滕皋军教授 学 校：东南大学 内容提要： 研究背景：经颈静脉月|：内门腔分流术(TIPS)为介入性治疗肝硬化、门静脉高压症的有 效方法。但是，TIPS存在的一个重要问题就是术后再狭窄。目前普遍认为其再狭窄的 基本病理改变与m管支架术后再狭窄相似，即假性内膜的过度增乍。假性内膜是由表面 一层内皮细胞及F方内含大量的平滑肌细胞(SMC)的胶原基质所组成，然而，有人发 现TIPS假性内膜中的内皮细胞非血管内皮细胞，且SMC的来源与血管平滑肌也有不 同。肝星状细胞(HSC)活化后在形态和生物学功能上与SMC有相似的特征，因此我 们推测HSC在TIPS再狭窄中起重要作用。支架的内皮化是维持支架通畅的重要条件， 而内皮素(Ets)是内皮细胞分泌的重要的多肽，在以上假设机制F，内皮素刈HSC的 作用有待研究。 目的：通过离体的细胞培养研究内皮素一l对大鼠_|¨=星状细胞表型改变及增殖的作用，闸 明内皮素．1在肝损伤不同阶段对HSC的影响，为TIPS术后分流道再狭窄的形成提供新 的理论依据。 方法：采用胶原酶、链霉蛋白酶灌注法分离人鼠的HSC，用含有o2％BSA的无血清的 DMEM培养液加入内皮素一l作用，24小刚后光镜观察细胞表型的变化；原代及传代培 养的HSC用含O 5％或2％的胎牛血清的DMEM培养24h后，3H一胸鲫密啶核苷掺入法 测定内皮素一1对肝星状细胞DNA合成的效应。 24小时后，细胞呈“活化”状态。(2)原代培养的HSC在O 5％的胎牛血清中，内皮素 的HSC在o5％或2 0％浓度的胎牛缸清中，加入不同浓度的内皮素一l的DNA合成量 明显降低。 结论：(1)内皮素一1对肝星状细胞活化的表型改变具有刺激作用。(2)在早期培养阶段， 在低浓度的胎牛血清中，内皮素一l刺激肝星状细胞的增殖，且与内皮素的浓度依赖关系。 在较高浓度的胎牛向清中，不同浓度的内皮素对HSC无显著的刺激或抑制作用。(3) 在传代的肝星状细胞高度活化阶段，内皮素一l显著地抑制HSC的增殖，但无浓度依赖 关系。 天鼍罐例：TIPS；再狭窄；肝星状细胞；内皮素一1；表型改变；细胞增殖 —— 查堕查兰堡主堂篁堡兰 一 oF EXPERIMENTIoN STELLATE HEPATIC oN EFFECTING CELLS Southeast University, China Nanjing，Jiangsu，PR 一 WU TENG Tmg Gao-jun Abstract： been used widely intrahepaticportosystemicshunts(TIPS)has Background：Transjugular