日本血吸虫鞘脂激活蛋白原T细胞免疫原性及功能研究.pdf

摘 要 日本血吸虫病仍然是在我国南方流行的一种人兽共患病。长期血防实践证明，要控制血吸虫 病的流行，有必要采用高效安全的抗血吸虫病的分子疫苗。因此，怎样合理高效地筛选和鉴定抗 血吸虫的保护性分子一直是个热点和难点课题。选择血吸虫体表相关分子，评价它们是否能够模 拟辐照致弱RA尾蚴疫苗的保护性效应机制，可能是个值得探索的方向。本课题组陈雷等前期的 初步研究发现：预测的含有信号肽的日本血吸虫鞘脂激活蛋白原(SjPSAP)分子可能存在于虫体 的体被膜上，来源于SjPSAP分子中的一个肽序列可能是个潜在的T细胞表位，推测它可能是个新 的抗血吸虫的保护性候选抗原分子。因此，本研究进一步评价TSjPSAP分子的免疫生物学功能， 旨在为高效合理发现抗血吸虫的保护性抗原提供基础。 首先，应用分子生物学技术克隆和表达SjPSAP分子，分析了该分子的免疫原性，观察了 (rSjPSAP)：Westen Bloting分析显示，该重组蛋白可被其免疫小鼠血清和感染日本血吸虫的小鼠 号。说明rSjPSAP具有一定的抗原性，该分子可以定位于血吸虫的体表膜部位。 护性效应功能，对该分子中可能存在的Th细胞表位进行了筛选和鉴定。首先是应Hj 分子结合的11条肽：然后用人工合成的预测肽免疫小鼠，用改进的MTT法体外检测发现预测肽中 在刺激后，脾细胞分泌至上清中的IFN．Y量显著增加；免疫鼠CD4+T细胞内细胞因子的分泌图式 式细胞术检测体外直接结合鼠脾细胞实验结果表明，62．62％一90．38％的细胞被生物素化的预测肽 分子中可能含有4个Thl细胞表位肽，这些肽表位都可以很好地与小鼠抗原递呈细胞直接结合。 I 能与其诱导的Thl细胞介导的免疫相关。 rSjPSAP及其表位肽免疫小鼠具有一定的抗血吸虫的效果；为进一步高效合理地发现抗血吸虫的 保护性T细胞抗原或表位提供了一定的理论和实验依据。 关键词：日本血吸虫：鞘脂激活蛋白原；Th细胞表位：免疫原性 Abstract SchistosomiasisremainsoneofZoonosesand inthesouthofChina．Tocontrol japonica prevalent is to effectiveand vaccines schistosomiasis，itnecessaryadopt safety against to and screenor moleeulesschistosomahasbeenoneof rationallyefficientlyidentifyprotective against the difficulttasks．Previousresearchesshowedthat effects hotand hi。gllprotectiveagainst beinducedin immunizated谢tll schistosomiasiscould varioushosts or mechanismofthis effectwasmediatedCD4+Thl cellsin schistosomula，the highprotective by the the contact withthehost mousemodel．In surfaceof addition，since parasite(tegumenOdirectly immune somemoleculesfromthe orsecretedfiomwormscouldbethe system，so tegument pro