显脉金花茶叶化学成分及分析测试方法研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 引 言 5 正 文 7 第一部分 显脉金花茶叶的化学成分研究 7 1 原料、仪器及试剂 7 1.1 原料及鉴定 7 1.2 实验仪器 7 1.3 试剂 7 2 化学成分的提取与分离 8 2.1 提取与分离 8 2.2 化学成分提取分离流程图 9 3 单体化合物的结构鉴定 9 3.1 化合物I 的结构鉴定 9 3.2 化合物II 的结构鉴定 12 3.3 化合物III 的结构鉴定 15 3.4 化合物IV 的结构鉴定 17 3.5 化合物V 的结构鉴定 20 3.6 化合物VI 的结构鉴定 24 3.7 化合物VII 的结构鉴定 26 4 显脉金花茶脂溶性成分的GC-MS 分析研究 29 4.1 材料和方法 29 4.2 结果与分析 30 4.3 讨论 33 5 化学成分研究小结 33 第二部分 显脉金花茶中山奈酚的定量分析 35 1 原料、实验仪器与试剂 35 1.1 原料及鉴定 35 1.2 实验仪器 35 1.3 试剂 35 1.4 对照品的纯度检查 35 2 山奈酚的含量测定 36 2.1 色谱条件的选择 36 2.2 样品提取条件考察 39 2.3 分析方法学研究 40 2.4 样品测定与结果 46 3 含量测定研究小结 47 第三部分 结果与讨论 48 参考文献 50 综 述 53 致 谢 64 攻读学位期间发表的学术论文目录 65 作者声明 66 个人简历 67 中 文 摘 要 目 的：以显脉金花茶(Camellia euphlebia Merr.ex Sealy)叶为研究对 象，分离分析其石油醚提取部位和氯仿提取部位及乙酸乙酯提取部位的 化学成分，并利用GC-MS 技术对显脉金花茶叶脂溶性成分进行了定性 分析，在化学研究之后，选择山奈酚作为含量测定指标，建立了测定显 脉金花茶叶中山奈酚的HPLC 分析方法，为显脉金花茶叶的质量标准制 定提供了方法和依据，本研究对进一步合理开发和利用该植物资源具有 重大的意义。 方 法：显脉金花茶干燥叶用95% 乙醇回流法提取得到乙醇总提取物， 用系统溶剂分离法分得其极性不同的石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯 部位和水饱和正丁醇部位；采用硅胶吸附色谱法、减压硅胶柱层析、重 结晶法等现代分离方法和技术对其化学成分进行分离和纯化，对分得的 1 13 单体化合物利用理化检验及UV 、IR 、H-NMR 、 C-NMR 、MS等波谱方 法进行结构鉴定；将显脉金花茶叶石油醚部位经柱层析分离得到油状流 份，以氢氧化钾-甲醇溶液进行甲酯化处理后利用气相色谱-质谱联用技 术 （GC-MS ）分别对它们的脂溶性成分进行分离和鉴定。采用利用高效 液相色谱法测定显脉金花茶叶中山奈酚的含量。 结 果：从显脉金花茶叶中石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位分 离得到10个化合物，鉴定了7个化合物，分别为：β-谷甾醇 （β-sitosterol）， α-菠菜甾醇 （α-spinasterol），正三十四醇 （n-tetratriacontanol ），β-香树素 （β-amyrin），齐墩果酸（oleanic acid ），olibanumol-L,山奈酚（kaempferol）， 采用GC-MS联用法对显脉金花茶叶石油醚部位的脂溶性成分进行了分离 鉴定，结果分离鉴定了其中的20个组分。HPLC 法测定显脉金花茶中山奈 酚的含量，山奈酚在0.10μg-0.40μg 范围内线性关系良好，平均回收率为 99.84% （RSD=1.59% ），测得山奈酚的含量为0.3182-0.3640mg/g。 结 论：从显脉金花茶叶提取物中共分离了10个化合物，鉴定了7个， 1 其中5个为首次从该品种金花茶中鉴定出来，3个为首次从该属植物中分 离鉴定出来。采用GC-MS法对显脉金花茶叶石油醚部位的脂溶性成分进 行分离和鉴定，鉴定了20个化学成分，为首次从该植物中分离鉴定。用 HPLC 法对显脉金花茶叶中山奈酚进行定量研究，建立了测定山奈酚的 HPLC含量