Pb-%272%2b-、Fe-%272%2b-对大鼠海马神经元动作电位依赖K-%27%2b-通道电流特性影响和4-AP在突触传递中药理和毒理学特性研究.pdfVIP

功.p-笋友术大学博士毖忿戈 ， 中戈茄要 摘 要 本文应用海马脑片和单细胞电生理实验技术较深入地研究了铅、铁对大鼠海 马神经元K通道电流特性的影响和4-AP在突触传递中药理和毒理学特性。 技术和方法:脑片和单细胞电生理实验技术 本论文中，除了进行传统的脑片场电位记录实验外，还利用经过处理的海马 脑片，在普通的倒置光学显微镜下进行了脑片膜片钳实验。利用急性分离的单个 鱼里丝全元，本论文还就铅·铁和4-AP对单细胞电生理特性的影响进行了研究。 验结果公利用电生理实验技术在大鼠海马标本上就以下领域进行了研究 铅对海马神经元钾电流、H一电流及突触自发放活动的影响; 厂 种重要的环境毒物。Pb*的神经毒理机制被广泛研究，但是Pb2*对神 奋性影响至今未有相关报道。本文的研究表明:在急性分离的大鼠海 马神经元上，10wMPb2+提高了动作电位的发放频率。Pb21影响动作电位发放频 率相关通道的研究结果证实: 铅不仅可逆和浓度依赖性地延迟了瞬时外向K十电流 (IA)的激活，抑制了IA 的表达，还浓度依赖性地使 IA稳态失活曲线向去极化方向移动，并且电压依赖 性地减缓了I、失活速率。研究还表明铅浓度和电压依赖性地抑制了延迟整流K 电流及增大Ca依赖性的外向K电‘流。 非选择性通透Na.K等阳离子的H一通道对静息膜电位的维持有着重要作用。 Pbz+可逆地抑制了H一电流表达;降低了H一通道电压敏感性。铅暴露导致H.电流 的压抑及H一通道的电压敏感性改变，可能是铅损伤神经活动的因素之一。 为了证实Pb2对动作电位的这一效应，我们研究了Pb2十对动作电位依赖的和 非依赖的突触前自发活动。结果表明:铅增强了动作电位非依赖性的突触前自发 放活动而抑制了动作电位依赖性的突触前自发放活动。看来此结果与Pb21提高动 盆护”放频率相矛盾，但这也从一个”I面说明了Pb对，经‘系统影响的复杂 2)铁对海马神经元钾通道的影响 ; 体内一种重要的必须微量元素。在海马神经元上，微摩尔浓度的Fee 未 电位的产生频率，但是降低了动作电位的幅度，增大了动作电位的宽 度 。我们研究了Fez对与动作电位相关K+通道的影响，结果表明:在低浓度Fee- 灌流条件下，用较低激活电压诱导K十电流时，结果IA和延迟整流K十电流提高了， 并且它们的稳态失活曲线向较低去极化的方向移动。另外，Fee还‘延长了从从失 活化状态中恢复的时程。 在海马神经元上，同时施加低浓度的Fez十与甘氨酸或GABA时，Fez显著性 地抑制了甘氨酸或GABA诱导的电流。这种抑制具有可逆性和浓度、电压和通 道开放依赖性。) 3)4-AP在突触传递中的毒理和药理特性研究 办-AP是一种临床药物，也是一种重要的工具药。本文在海马脑片及急性分离 的海马锥体细胞上就4-AP突触水平的作用机制进行了研究。结果表明: 在突触前，4-AP压抑了双脉冲易化效应和促进了突触疲劳。 在突触后，4-AP增加了NMDA和AMPA受体依赖的fEPSPs幅度，压抑了 NMDA和GABA诱导的电流。4-AP对AMPA诱导的电流虽然作用不明显，但 功母科学炭术才学博士活戈 二 功丈简耍 几乎完全阻断了KA诱导的电流。 研究4-AP对细胞兴奋性的影响表明:4-AP增高了动作电位的发放和突触自 发愧翼赞锡，力口了突触前递质的释放，、可能是导致*PSPs、大的直 接原因;由于4-AP对兴奋性和抑制性的突触后靶受体均表现为抑制效应，所以 4-AP对突触后的效应可能起着次要的作用。 关键词:铁;铅;4-AP，膜片钳，fEPSPs记录，大鼠海马 沪.解学炭1f}犬学博士老丈 冲 Abstract Withacutelyd