特殊生境放线菌抗耻垢分枝杆菌活性筛选及一株阳性菌株初步研究.pdfVIP

摘要 摘要 随着陆生放线菌资源不断被发掘和深入研究，常规发酵方法下所得到的次生 代谢产物资源越来越稀少，为新药发现造成阻碍。目前，很多学者已经把目光投 向了一些特殊生境中的放线菌，包括海洋、动植物内生和一些极端环境。近些年 来，由于耐药结核菌 ⅫR-113，加R．TB 的产生和传播，使全球范围的结核病 疫情有上升趋势。耐药菌株对临床上常用的利福平等药物已产生严重耐药性，近 五十年未发现新靶点的抗结核临床一线药物。因此，寻找具有抗结核分枝杆菌活 性的新化合物仍是制药领域所迫切需要的。而特殊生境中的放线菌次生代谢产物 在结构和生物活性方面具有丰富多样性，是寻找新型抗结核药物的潜力资源。 因为许多药物类似物对靶点发挥抑制作用的具体机制还无法确定，所以在新 药筛选的方法上，基于活性的传统天然产物药物的筛选仍具有很大优势。这需要 依赖于全细胞水平的体外实验。 本文以耻垢分枝杆菌 够瑚6粥幼锄露册锣黝眩 为指示菌，对实验室分离 纯化的296株来源于海底底泥、红树林植物、高原土样和蜚蠊内生的放线菌进行 抗耻垢分枝杆菌活性筛选，发现46株阳性菌株，分布于链霉菌属和小单胞菌属． 阳性率为15．5％。选取四种固体培养基及四种液体培养基对46株阳性菌株进行 培养基筛选，每种培养基均发酵100mL获得发酵物。共得到368个样品。测定 粗提物样品的抗耻垢分枝杆菌活性，并综合产量因素从中选出19株活性较高的 优势菌株及其发酵的培养基。将19株优势菌株进行1L规模的发酵，发酵产物 采用反相柱层析初步分离成为几个组分，建立一个具有抗耻垢分枝杆菌活性的次 生代谢产物组分库。 组分库可继续用于抗耻垢活性化合物的追踪分离，并且支持其它拮抗活性模 型的筛选。本文采用mT法对次生代谢产物组分库进行了抗HeLa和HepG-2 肿瘤细胞活性的筛选。 链霉菌灿H7为一株筛选出的优势阳性菌株，粗提物在改良LB平板上测抗 耻垢分枝杆菌的活性良好。本文对其燕麦培养基发酵得到的次生代谢产物作了初 摘要 步研究，分离纯化得到两个化合物Q．A．1及Q．A．4，并鉴定结构。但化合物抗耻 垢分枝杆菌的活性较弱。代谢产物分离纯化有待进一步研究。 关键词：特殊生境；放线菌；抗耻垢：次生代谢产物 lI Abs廿act Abstract terrestrial resourcesarecon discoVered 础ong谢th ac血onlycetes s．talltlybeillg and studied，tIle metabolitereSources conVernionaLl i11-depm secondaI r producedby f．ennentationbecome scarce．TheSeareobstaclesforme iIlcreasmgly discoVer ，of haVefocuSedonme new iIl ScholarS drugsp11armaceuticaliIldust巧．Atpresent，many and speciaJk出hts，includiIlgmariIle，砒liI】舱lplantendophydc ac血oⅡlycetes丘Dm 锄dsomeexCrcmee11啊r伽【IIlenhrecent t0也e aIld years，duegenerat