雌二醇对多发性骨髓瘤成骨细胞病理机制的干预作用.doc

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 英文缩略词简表  英文缩写 MM OPG E2 CM IL ALP β2-MG bp RT-PCR ELISA MTT DMSO DEPC FBS  英文全称 Multiple myeloma Osteoprotegerin 17β-oestradiol conditioned media interleukin alkaline phosphatase β2- microglobulin base pair polymerase transcription polymerase chain reaction enzyme linked immunosorbent assay etraozolium blue dimethyl sulfoxide diethyl pyrocarbonate fetal bovine serum 1  中文全称 多发性骨髓瘤 护骨素 17β-雌二醇 条件培养基 白介素 碱性磷酸酶 β2-微球蛋白 碱基 逆转录聚合酶链 式反应 酶联免疫吸附 四甲基偶氮唑蓝 二甲亚砜 二乙基焦磷酰胺 胎牛血清 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集 体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中 以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：  日期：  年  月  日  学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。  本论文属于  保密□ ，在_____年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√”）  学位论文作者签名：  指导教师签名：  日期：  年  月  日  日期：  年  月  日 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 雌二醇对多发性骨髓瘤成骨细胞病理机制的干预作用 华中科技大学附属协和医院血液科 硕士研究生：俞钶  导  摘  师：邹萍 要  教授  第一部分 多发性骨髓瘤患者血清 OPG 检测及临床意义 【目的】护骨素（osteoprotegerin，OPG）是近来研究发现在多发性骨髓瘤骨病发生发 展中起重要作用的因子。本研究旨在探讨 OPG 在多发性骨髓瘤患者血清中的表达水 平及其与骨病、预后的关系，初步探索其在多发性骨髓瘤骨病和预后判断中的作用。 【方法】收集 28 名多发性骨髓瘤患者试验组和 28 名眼科患者对照组的血清，采用双 抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）技术分别检测血清中的 OPG 水平。 【结果】 多发性骨髓瘤患者的血清 OPG 水平为（222.4±114.8）pg/ml，与对照相 比明显降低（P0.01）。骨损 0－1 个组患者血清 OPG 水平为（312.4±129.6）pg/ml， 而 2－3 个组为（179.0±59.4）pg/ml，0－1 组明显高于 2－3 组（P0.01）。多发性 骨髓瘤患者血清 OPG 水平与 β2－微球蛋白有关（P0.01），与白蛋白可能有关 （P=0.0696），与球蛋白相关（P0.01），与临床分期、免疫学分型、血红蛋白、血 钙未发现有相关性。 【结论】多发性骨髓瘤患者血清 OPG 水平明显低于对照，且其降低程度与骨损害的 严重程度密切相关；同时，OPG 水平与 β2-微球蛋白呈负相关，而 β2-微球蛋白是 反映多发性骨髓瘤预后的明确指标，提示血清 OPG 水平可能对多发性骨髓瘤的预后 具有重要意义。 【关键词】 多发性骨髓瘤；血清 OPG 水平；骨病；预后情况 2 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文  第二部分  雌二醇对多发性骨髓瘤成骨细胞病理机制的干预作用  【目的】 本研究旨在探讨 17β-雌二醇（17β-oestradiol，E2）对体外培养的多发性 骨髓瘤共培养条件下的成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性、矿化结节形成能力和基因表 达的作用，探索其在多发性骨髓瘤骨病的治疗中的作用。 【方法】 以含 20%多发性骨髓瘤细胞条件培养基的 DMEM 常规培养原代成骨细胞， 以各浓度的 17β-雌二醇作用于成骨细胞，24 小时后用 MTT 法检测细胞的增殖变化； 48 小时后检测 ALP 活性；14 天后茜素红染色测定矿化结节形成情况。将 MM 细胞与 成骨细胞