TGF-β1抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的研究.docVIP

?８６ 是目前细胞移植治疗缺血性脑血管病亟待解决的问  Ｓｔｒｏｋｅ ａｎｄ Ｎｅｒｖｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ａｐｒ ２００８，Ｖｏｋ １５，Ｎｏ．２ 次漂洗后加入ＦＩＴＣ（异硫氰酸荧光黄）标记的ＩｇＧ 题。本研究旨在以用血清剥夺和缺氧（ｓｅｒｕｍ ａｎｄ 二抗，然后用碘化丙啶（ＰＩ）染核，细胞核为红色，细 ｏｘｙｇｅｎ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ，ＳＯＤ）处理模拟缺血微环境诱 胞浆和细胞膜着色呈绿色者为阳性细胞。 导ＭＳＣｓ凋亡，深入探讨转化生长因子６１（ｔｒａｎｓｆｏｒ－ １．２．３ ＭＳＣｓ体外处理及分组 ｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ６１，ＴＧＦ－ｆ１１）是否能够抑制 ＭＳＣｓ凋亡，从而为提高移植细胞的存活率、改善Ｉ临 床治疗效果提供实验依据和理论基础。 １材料与方法 １．１实验材料 ＴＧＦ－ｐＩ购自ＳＩＧＭＡ公司；高级胎牛血清 （ＦＣＳ）、ＤＭＥＭ培养基、胰蛋白酶购自Ｈｙｃｌｏｎｅ公 司；Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ－ＦＩＴＣ细胞凋亡检测试剂盒购自北 参照Ｚｈｕ等的方法［４］并稍作修改通过血清和 氧剥夺（ＳＯＤ）方式建立ＭＳＣｓ体外模拟缺血损伤的 细胞模型。ＭＳＣｓ用０．０１ Ｍ ＰＢＳ洗涤２次，以去除 残留的培养基，加入无血清ＤＭＥＭ，然后将细胞培 养瓶或培养板置于密闭的恒温培养箱中，向培养箱 内持续缓慢通人含有９５％的Ｎ：和５％的ＣＯｓ的混 合气