雨生红球藻中虾青素的分离提取及其性质的研究.pdfVIP

摘要 虾青素是一种具有强抗氧化作用的类胡萝1-素。本文以雨生红球藻藻粉为原料，建立了分析 测定虾青素的方法，优化了常规溶剂提取、微波提取、超声波提取以虾青素酯为主的粗色素油的 工艺条件，采用响应面法优化了虾青素酯的皂化条件，利用大孔树脂和硅胶柱层析对虾青素提取 物进行了除碱利分离纯化，研究了Cu2+、微波、超声波对反式虾青素稳定性的影响以及皂化前后 的提取物的抗氧化活性。实验结果如下： 1．建立了分析测定雨生红球藻中虾青素的薄层色谱法、分光光度法、高效液相色谱法。薄 层色谱法用于分离雨生红球藻中的虾青素合适的展开剂为正己烷：丙酮=7：3，展开时间为10 nm，加样回 mira分光光度法测定乙酸乙酯利乙醇的混合溶剂提取的粗色素油的测定波长为472 (250×4．6mm)．流动相为二氯甲烷：甲醇：乙腈：水=5：85：5：5．检测波长480nlTl，流速lmL／min， 2．确定了体积比为1：2的乙酸乙酯和乙醇为提取雨生红球藻中虾青素的适宜溶剂；对常规 溶剂提取、微波提取、超声波捉取虾青素酯为主的粗色素油的条件进行了优化。常规溶剂提取法 的最佳条件为：温度为254C、提取次数为2次，提取时间为6h、固液比为1：60(g／mL)；微波 提取的晟佳条件为：功率为14IW、提取时间为83 sec、固液比为1：50(g／mL)，提取次数为4 次；超声波提取的最佳条件为：功率为163W、提取时间为3 min、固液比为1：35(g／mL)，提 取次数为4次。与常规溶剂提取相比．微波提取法耗时短、提取量高，适合于雨生红球藻中虾青 素的提取，而超声波法在这种色素的提取上没有表现出自身的优越性。 3．4C下的最佳皂化条件为：皂化时间11．45 M．加热条件下虾青素酯的最佳皂化条件为：粗色素油浓度4．56 M、皂 mg／mL、碱的浓度O．054 化温度30℃，皂化时间20min。两种优化条件下得到的游离虾青素的量之间无显著性差异 (P0．05)。 4．采用HPDl00型吸附树脂吸附．经过水一乙醇一丙酮分步洗脱，可以达到除碱和初步纯化 的目的，再用ZCX—II型硅胶作为固定相，用正己烷一正己烷：丙酮(7：3，V／V)一丙酮分步洗脱， 收集液真空浓缩后，可以得到含游离虾青素8．3％的膏状提取物。 5．研究了化学因素(Cu“)和物理因素(微波、超声波)对反式虾青索稳定性的影响。人 体必需的微量元素之一铜利微波、超声波这两种常用的辅助提取方法都降低了反式虾青素的稳定 性，cu”利微波处理使反式虾青素发生了异构化。与Cu2+和微波处理不同，超声波处理并没有导 m 致顺式异构体的产生，很可能将反式虾青素降解成其它无色的化合物，它们在294nm和324 附近有吸收。 6．雨生红球藻提取物皂化前后都具有抑制亚油酸氧化、消除DPPH自由基、还原三价铁离 子、抑制LOX酶活性的能力。皂化前的粗提物的抑制Ⅱ油酸氧化和清除DPPH自由基的能力比 皂化后强，而还原三价铁离子的能力则皂化后粗提物稍强，但相差不多(3．2％8．9％)，二者对 LOX酶活性的抑制能力没有显著差别。 关键词：雨生红球藻，虾青素，提取，皂化，稳定性．抗氧化性 Abstract Astaxanthinisoneofcarotenoidswith antioxidant was potent activity．Haematococcuspluvialis for chosenasrawmaterialastaxanthinextractioninthis methodsfor astaxanthin