丹参单体IH764-3对百草枯中毒大鼠肺纤维化影响研究.pdf

中 文 摘 要 丹参单体 IH764-3对百草枯 中毒大鼠肺纤维化的影响研究 摘 要 目的:百草枯(paraquat,PQ)，是目前世界范围内广泛使 用的除草剂。随着其在我国农业上的广泛应用，PQ中毒也 日趋增多。虽然PQ对除草非常有效，但它对人和动物的毒 性很高。目前对其发病机制尚未完全阐明，尚无特效治疗药 物。因此PQ中毒所引起的机体病理生理改变成为当前中毒 治疗学的研究热点。本研究通过观察PQ中毒大鼠模型肺组 织病理学和肺组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、膜型基质金 属蛋白酶1(MT1-MMP)在急性PQ中毒大鼠肺纤维化中的表 达，以及丹参单体IH764-3对上述指标的影响，进一步探讨 急性PQ中毒肺纤维化的机制及丹参单体IH764-3对其治疗 作用。 方法:选用健康成年SD大鼠90只(雌雄各半)，随机分 为3组:正常对照组(以下简称A组))6只，单纯染毒组(以下 简称B组)42只，丹参单体IH764-3治疗组(以下简称C组)42 只。B.C组给予50mg/kgPQ灌胃染毒，A组给予与相当量 的生理盐水灌胃;之后，C组每日给予40mg/kg丹参单体 IH764-3腹腔内注射，而A.B组每日给予相当量的生理盐 水腹腔内注射。B组、C组分别于Id,3d,7d,14d,21d, 28d,35d各取6只大鼠，氯胺酮麻醉后开胸，剪取右肺心叶 (约l00mg)迅速置于4C1%o焦碳酸二乙P(DEPC)中洗去血 液，放进1.5m1离心管 (EP管)中，在液氮中速冻，然后置 中文 摘 要 于一85℃保存，后期提取肺组织RNA，然后采用RTPCR法 测定肺组织匀浆MMP-2,MT1-MMP的表达;左肺部分取材 行1a:染色进行病理观察，并用电子显微镜对超微结构的变 化进行观察。对照组行同样处理。 结果:①大鼠中毒表现:B组、C组大鼠在染毒后 30min-2h即可出现不同程度的中毒表现，包括呼吸系统、精 神神经系统和消化系统表现等全身中毒表现，且在 1-3d最 明显;3d后中毒症状逐渐减轻。C组大鼠中毒表现较B组(尤 其是呼吸系统)明显减轻。②B组大鼠体重于3d明显下降， 与染毒前体重比较有统计学意义，t=10.362,P0.05oC组大 鼠体重于3d下降不明显，与染毒前体重比较无统计学意义。 B组体重于21d明显增加，与染毒前体重比较有统计学意义， t=48.294,P0.01，与3d体重Lt较有统计学意义，t=58.656, P0.01oC组体重于21d明显增加，与染毒前体重比较有统 计学意义，t=64.280,P0.01，与3d体重比较有统计学意义， t=66.256,P0.01。③MMP-2mRNA:B组:MMP-2mRNA 的转录从1d就明显增强，为A组的2.14倍.t=0.349,P0.01; 1d即达高峰，此后开始缓慢下降，3d,7d,14d和21d分别 为A组的2.04倍、2.09倍、1.75倍、1.81倍，t值分别为0.318, 0.333,0.228,0.248,P0.01;28d,35d与A组相比无统计 学意义。C组:MMP-2mRNA的转录从Id就增强，为A组 的1.71倍，t=0.218,P0.01;3d和7d分别为A组的1.86 倍、1.69倍，t值分别为0.262,0.210,P0.01:其他时段与 A组相比无统计学意义;在3d达高峰后就逐渐下降，下降 至正常的时间(14d)较B组(28d)为旱:1d,7d,14d,21d与 B组同时段相比均有统计学意义，t值分别为0.131,0.123, 中文 摘 要 0.174,0.179,P0.01;3d,28d,35d与B组相比无统计学 意义。.MT1-MMPmRNA:B组MT1-MMPmRNA的转录 从Id就明显增强，为A组的2.04倍，t=0.405,P0.01;3d, 7d,14d和21d分别为A组的1.95倍、1.51倍、2.05倍、1.74 倍，t值分别为0.371,0.199,0.412,0.289,P0.01;在14d 达高峰后逐渐下降，28d,35d与A组相比无统计学意义口C