miR-SNP与结直肠癌易感性及化疗疗效相关性研究.pdf

致谢负性协同刺激分子B7-H1 在人结直肠癌中表达及其调控机制的研究 II miR-SNP 与结直肠癌易感性及化疗疗效相关性研究 中文摘要 中文摘要 第一部分 miR-SNP 与结直肠癌易感性及化疗疗效相关性研究 【目的】探讨microRNA 相关的SNP 与结直肠癌发生的易感性和肿瘤临床病 理学参数、化疗疗效的相关性。 【方法】1、筛选microRNA 相关的SNPs 位点，并设计等位基因特异性引物； 2 、收集300 例健康志愿者和175 例结直肠癌患者的外周血，从中提取DNA ；3、 采用等位基因特异性扩增法（ASA ）测定SNPs 基因型；4 、用统计学软件分析SNPs 基因型与结直肠癌发生、肿瘤临床病理学参数及化疗疗效的相关性。 【结果】（1）分析6 个microRNA 相关的SNPs 位点基因型的结果表明：在 结直肠癌患者和健康人群中，rs2910164 、rs895819 、rs7911488 和rs2292832 的等 位基因及基因型分布频率存在显著统计学差异(P ＜0.05) 。其中，尤以rs7911488 、 rs2292832 与结直肠癌发生的相关性最为突出，与rs7911488 位点AA 基因型相比， AG 基因型（OR=0.406, 95% CI=0.257-0.642 ）和G 等位基因携带者（OR=0.469, 95% CI=0.300-0.732 ）患结直肠癌的风险均更低；与rs2292832 位点 TT 基因型相比， CT 基因型（OR=8.786, 95% CI=5.237-14.740）和C 等位基因携带者（OR=4.452, 95% CI=2.769-7.159 ）患结直肠癌的风险更高。而rs3746444 、r的等位基因及 基因型分布频率在结直肠癌和正常人群分布中的差异无统计学意义(P0.05) 。（2 ） rs3746444 位点TT 基因型和rs7911488 位点AA 基因型在低分化患者中的频率显著 低于CT 基因型（7.14% vs 38.46% ）和AG 基因型（2.12% vs 18.05%）。（3 ）rs7911488 的基因型与化疗疗效反应相关（P=0.041 ），与AA 基因型相比，AG 基因型患者 （OR=0.194 ，95% CI=0.045-0.842 ）和 G 等位基因携带者 （OR=0.222 ，95% CI=0.053-0.940 ）化疗疗效更差；rs895819 位点的基因型与化疗毒副反应几近相关 （P=0.084 ），与TT 基因型相比，CC 基因型患者毒副反应更大（OR=3.469，95% CI=0.860-13.989）。其余SNPs 位点的基因型与结直肠癌化疗疗效和毒副反应均未 见显著相关性。 【结论】SNP 位点rs7911488 和rs2292832 与结直肠癌的发生显著相关，其G 等位基因和T 等位基因可能对结直肠癌发生起到保护作用。 I 中文摘要 miR-SNP 与结直肠癌易感性及化疗疗效相关性研究 第二部分 rs7911488 对miR-1307 表达水平及miR-1307 对靶基因表达的影响 【目的】研究rs7911488 对miR-1307 表达水平的影响和miR-1307 对靶基因 表达的影响。 【方法】1、构建 （CC 和TT 基因型）miR-1307 表达载体，转染人胚肾细胞 株HEK293t ，采用实时荧光定量PCR 法测定不同基因型miR-1307 的表达；2 、生 物信息学软件预测 miR-1307 的靶基因；3 、构建靶基因荧光素酶表达载体，将 miRNA 与构建好的载体共同转染 CHO 细胞，并用双荧光素酶报告系统检测基因 活性；4 、运用统计学软件分析 rs7911488 对 miR-1307 表达水平的影响以及 miR-1307 对靶基因调控作用的影响。 【结果】 （1）rs7911488位点CC基因型miR-1307表达水平较位点TT基因型明 显上升（