生物技术实践复习指南.pdfVIP

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}稚摊 l●鞔t暂 《 琶鞔£藏鞔。巷 琶辩矗铣£键盘《。孰 生物 ·查漏补缺 誊 (3) 消毒和灭菌的区别(见下表) 条件 结果 常用的方法 应用的范围 较为温和的 仅杀死物质表面或内 煮沸消毒法 一般物品 消毒 物理或化学 部一部分对人体有害 巴氏消毒法 不耐高温的液体 方法 的微生物 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源等 强烈的理化 杀死物体内外所有的 灼烧灭菌 接种工具 灭菌 因素 微生物,包括芽孢和 干热灭菌 玻璃器皿、金属工具 孢子 高压蒸汽灭菌 培养基及容器的灭菌 (4)纯化大肠杆菌的原理:在培养基上 和固定化细胞是利用物理和化学方法将酶或 将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个 细胞固定于一定空间内的技术。 的菌落,这个菌落就是—个纯化的细菌菌落。 f包埋法:适合于较大的细胞 考点二:酵母细胞的固定化 常用方法殇物{【差理蘸吸禽附法}』适胆。用厂仃于J酶叫的怛固l定^匕 (1)实验原理:① 固定化酶不溶于反应 (2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞 液中,易于回收,可以重复使用。② 固定化酶 的比较(见下表) 方法 优点 缺点 直接使用酶 催化效率高 对环境条件非常敏感、易失活;难回收,成本 、 耗能低、污染低 高 ,影响产品质量 固定化酶 既能与反应物接触 ,又能与产物分离;可 不利于催化 以反复利用 一 系列的酶促反应 固定化细胞 成本低 反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反 、 操作容易 应效率下降 (3)制备固定化酵母细胞成功的关键 酸钠溶化时要用小火问断加热,避免海藻酸 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的 钠发生焦糊。 一 环 ,如果浓度过高,将很难形成凝胶珠 ,如 !》考点三:五种重要物质的提取 果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细 (1)提取方法总结 胞的数量少,都会影响实验效果,同时对海藻 提取物质 提取方法 提取原理 步骤 ① DNA在不同浓度 的NaC1溶液中① 溶解在2mol/L的NaC1溶液中;② 加水 DNA 盐析法 溶解度不同;② DNA不溶于酒精 ,稀释至O.14mol/LNaC1溶液使 DNA析出过 但某 胥白质则溶于酒精 滤;③ 加入冷却酒精析出 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小 ①样品处理 ffn窖T胥 白 根据各种分子带电性质差异及分子

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