大鼠皮层神经元机械性损伤模型中p75NTR、Bax、Bcl -2表达及细胞凋亡.pdfVIP

中华创伤杂志2012年2月第 28卷第 2期 ChinJTrauma，February2012，Vo1．28，No．2 ·179 · · 基 础 研 究 · 大鼠皮层神经元机械性损伤模型中p75NTR、 Bax、Bcl一2表达及细胞凋亡 刘海春 辛涛 杨凯云 武文亮 陈允震 【摘要】 目的 研究大鼠神经元机型性损伤后p75NTR、Bax、Bcl一2表达改变及神经细胞凋 亡情况 ，分别探讨其在神经元凋亡过程中的作用机制及相互作用方式。 方法 制备大鼠神经元 体外培养机械性损伤模型，测定损伤后神经元细胞的凋亡率，依据不同损伤程度分为轻、中、重度 损伤组和对照组，应用特异性抗体细胞免疫法检测各组别间神经元 Bax、Bcl一2表达的差异。应用 Westernblot法检测各组间p75NTR蛋白表达水平的差异。 结果 损伤后神经元细胞的凋亡率 明显高于正常对照组神经元。重度损伤组较中度损伤组和轻度损伤组显著升高(P0．05)。机械 性损伤各组均有Bax、Bcl一2的表达，且不同损伤程度组别间表达水平差异有统计学意义。重度损 伤组 Bax显著高于中度损伤组和轻度损伤组(P0．05)。 结论 p75NTR表达、Bax／Bcl一2比值 与神经元凋亡密切相关。p75NTR早期表达可能是神经元损伤后细胞凋亡的因素之一 ，Bax、Bcl一2 可能与这一过程相关。 【关键词】 颅脑损伤；神经元 ；大鼠； 蛋 白 Expressionsofp75NTR，Bax and Bcl-2and cellapoptosisin ratcorticalneuronsfollowingme- chanical injury LIUHal—chun ，XIN Tao，YANGKai—yun， Wen—liang，CHEN Yun—zhen． DepartmentofTrauma，QiluHospitalofShandongUniversity，Jinan250012，China Correspondingauthor：CHEN Yun—zhen．Email：cyzl12@ yahoo．com．ca A【bstract】 Objecfive Tostudytheexpressionsofp75NTR，BaxandBcl一2andcellapoptosisin ratcorticalneuronsfollowingmechanicalinjuryanddiscussthemechanismnadmutualactionwayduring theapoptosisofratneuronsaftermechanicalinjury． Methods Corticalneuroncultureswereprepared fromthebraintissuesofday17ratembryosandwereexposedtomechanicalinjury sevendaysaftersee— ding．Afterthetraumaticneuroninjurymodelswerecreated，theapoptosisratioofneuronswastestedat severaltimepoints．Themodelsweredividedintotheminor，moderate，severeinjury groupsaccordingto theinjuryseverityandthecontrolrgoup．TheexpressionsofBaxandBcl-2ineachrgoupweredetectedby immunohistochemistrymethodnadthatofp75NTR byWestern—blot．Comb iningwithcellularapoptosisratio ineachrgoupshownafterFCM analysis，thecorrelationbetweentheexpressionsofp75NTR，BaxandBcl一 2andtheapoptosisinratneuronsaftermechnaicalinjurycouldbeanalyzed． Results Theapoptosisratio oftheneuronsinalltheinjuryrgoupswasobviouslyhig