低剂量伽玛刀照射实验性癫痫老龄大鼠海马神经元超微结构观察.pdfVIP

第 31卷 第 1期 电 子 显 微 学 报 Vo1．31．No．1 2012年 2月 JournalofChineseElectronMicroscopySociety 2012—02 文章编号 ：1000—6281(2012)O1-0047-04 低剂量伽玛刀照射实验性癫痫老龄大鼠 海马神经元超微结构观察 杨传红 ，赖晃文 ，唐庚云 ，王 捷 ，梁军潮 ，詹纯列 ，吴小丽 (广州军区广州总医院 1．医学实验科 ；2．神经外科 ，广东广州 510010) 摘 要 ：目的：观察低剂量伽玛刀照射 实验性老龄癫痫大鼠海马神经元超微结构的变化。方法 ：采用青霉素定位浸 润建立老龄大鼠癫痫动物模型 ，将 57只老龄大 鼠分为对照组 、癫痫组和癫痫后伽玛刀照射组。照射周边剂量 12 Gy，等剂量曲线为 5O％，0．5h～60d后取靶 区海马制备 电镜样品，透射 电镜观察。结果：对照组海马神经元 的超微 结构正常；癫痫大 鼠可见神经元细胞器明显空化 ，部分神经元凋亡；伽玛刀照射组早期与癫痫模型组基本一致 ，中 期和晚期部分结构得 以恢复，线粒体修复较为明显 。结论 ：老龄癫痫大 鼠经低剂量伽玛刀照射 ，中、晚期海马神经 元 的超微结构改变得 以修复，可为临床治疗老龄癫痫提供形态学依据 。 关键词 ：老龄大鼠；癫痫 ；伽玛刀；海马神经元 ；超微结构 中图分类号 ：R742．1；R361．3；Q336 文献标识码 ：A 有研究报道 ，癫痫大 鼠发作后大量神经元变性 、 记录大脑皮质脑电图，在大鼠左后肢的股四头肌插 坏死 ，同时产生大量的 自由基作用于线粒体 ，破坏线 入肌电图电极 ，记录肢体抽搐时的 EMG，以筛选制 粒体的结构并产生细胞毒作用 ，致使 中枢神经系统 作成功的动物模型。模型大鼠均于 10～20min后 线粒体功能障碍 ，影响能量代谢 。本研究用立 左侧肢体和面部肌 肉开始抽搐并逐渐加剧 ，且 EMG 体定向定位架，以青霉素导致癫痫为模型，研究癫痫 发现大鼠股 四头肌 出现 阵发性肌 电活动，提示癫痫 3d后低剂量伽玛刀照射后不 同时程海马神经元超 模型制作成功。取制作成功 3d的青霉素致痫 SD 微结构 的改变 ，初步探讨癫痫与海马神经元 的关系， 大 鼠18只，氯胺酮 100mg／kg腹腔注射麻醉 ，固定 探讨低剂量伽玛刀作用于老龄癫痫大 鼠后海马神经 于 自行设计的伽玛刀专用大鼠头架 ，进行脑 MRI冠 元的超微结构变化，为老年癫痫患者的治疗提供实 状面的连续扫描 ，根据图像计算靶 区三维坐标 。然 验依据 。 后采用4mm准直器，进行伽玛刀脑组织照射，周边 剂量 l2Gy，等剂量曲线为50％，中心剂量为24Gy， 1 材料与方法 照射时间为6min。实验大鼠处死时间为术后 3h、6 1．1实验动物分组 h、12h、24h、3d、7d、14d、30d和60d，每一时间处 健康 SD大鼠57只，2年龄 ，雄性31只，雌性26 死 3只，取海马制备透射电镜样品。另外27只致痫 只。雄性体重452～500g，雌性体重 320～350g，由 大 鼠麻醉后 固定于专用 固定架 ，放在伽玛刀室 内 广州军区广州总医院实验动物 中心提供 ，动物随机 (不启动伽玛刀)6min，其他处理同癫痫后伽玛刀照 分组 ：对照组 3只，癫痫模型组和癫痫后伽玛刀照射 射组。3只对照组老龄大 鼠，用等渗盐水取代青霉 组各 27只。 素，按癫痫模型组方法取海马制备 电镜样品。 1．2 动物模型的制备