昔维考拉地霉感染的临床与试验研究.pdf

中文摘要 昔维考拉地霉的临床与试验室研究 摘 要 目的：按照传统的分类方法，地霉主要分为白地霉 (Geo廿ichum candidum)、头地霉(Geotrichum capitatum)、 棒地霉(Geo打ichumclavatum)。其中自地霉和头地霉最为 常见。近lO年来有关地霉的报道较少。本科于2002年8 月在一例脓癣样地霉病的患者身上分离出一种新型地霉，经 中科院微生物研究所鉴定为昔维考拉地霉(Geotrichum silvicola)。本菌在1997年新版的国家菌种目录中尚无收录， 是从巴西果蝇身上分离出来的一种地霉，尚未被正式发表 过，从人身上分离出本菌是国内、外首次。因此，有关昔维 silvicola)的形态学、营养生理学及 考拉地霉(Geotrichum 其对人类的致病力国内外尚无报道，仅就其基因学方面有初 步的研究。本研究从形态学、营养生理学、分予生物学等各 silvicola)进行初步的 个角度对昔维考拉地霉(Geotrichum 研究，并通过动物试验及毛发受侵试验对其致病力进行进一 silvicola)感 步的探讨。为指导昔维考拉地霉(Geotrichum 染的诊断与治疗提供了临床依据，具有重要的理论和现实意 义。 方法 1真菌培养将菌落接种于改良沙堡弱培养基上，分别 然后观察菌落生长情 放在27C、37℃温箱中，培养3天， 况。直接镜检：挑取少许菌落放于载玻片上，加IO％KOH 并放置盖玻片，在低倍、高倍镜下仔细观察菌落形态。扫描 中文摘要 电镜观察：将培养3～10天的菌落放于2．5％的戊二醛中固定， 扫描电镜观察。 2毛发受侵试验将该菌分别接种于改良沙堡弱固体培 养基、液体培养基中，采用3个不同年龄组的健康人的毛发， 高压灭菌后置于所种菌上方。每l周观察2次，在光镜、电 镜下观察毛发受侵情况。将全部数据进行统计学处理后得出 结论。用SAS统计学软件组间比较的t检验及方差分析法。 3动物试验选用豚鼠60只。随机抽取30只豚鼠用环 磷酰胺800mg／kg腹腔内注射，地塞米松O．5mg／只肌注，另外 30只未经处理。3天后，对两组中的豚鼠的一侧背部分别用 擦皮法和皮下注射法接种菌悬液(浓度为2×106CFU)，另 外一侧接种0．9％的生理盐水做对照组，10天后观察结果。 将全部数据进行统计学处理后得出结论。各试验组计量资料 用SAS统计学软件组问比较的t检验。 4营养生理学将菌落接种子改良沙氏培养基上，3天 后配置菌悬液，利用法国生物梅里埃公司的APl20CAUX试 WalkAway-40全自动 剂盒检测，美国德灵公司的Microscan 微生物分析仪分析。 5DNA序列分析对菌株26SDNADI／D2区序列分析 经正反链验证，确定了534个碱基位点，通过 GenB锄k／EMBL／DDBJ伊DB核酸序列数据库进行同源序列 检索。 6温度试验将受试菌株接种在沙堡弱固体培养基上， 9C、42(2温箱中，7天后观察生长情况。 分别放在27。C、37 然后，将27。C温箱中的菌株放在37(2温箱中，将37C温箱 中的菌株放在27。C温箱中，3天后再观察结果。 中文摘要 7体外药敏试验使用天津金章医用新技术研究所提供 的酵母样真菌最低抑菌浓度(MIC)药敏试剂盒。将受试菌 株在用沙堡弱培养基传代纯培养，制成混悬液。用麦氏O．5 号管进行比浊至相同浊度。接种后，放到35。C温箱中，孵 育24h、48h观察结果。 结果 1形态学真菌培养培养3天后均见同一菌落生长， 27