再生障碍性贫血和急性白血病患者血清血小板生成素水平的测定及临床意义硕士论文.pdfVIP

中文摘要 刖 吾 and (megakaryocytegrowthdevelopmentfactor，MGDF)，是细胞因子受体超 家族中的一员一c—mpl的配体。1958年，人们提出体液中存在调控血小板 造血的因子，但鉴定该因子的努力一直没有获得成功。1994年，DeSauvage 等采用亲和层析法首先纯化了猪的C—mpl配体，克隆了人的c—mpl配体 的c—DNA。它就是人们一直探求的血小板生成素(TPO)。此后国内外对 其分离、结构、生物学活性及在临床疾病中的意义进行了大量的研究，表明 了血小板生成素水平检测有助于判断血小板减少的原因，指导治疗，估计预 为低分子量糖蛋白，分子量为60—70Kda，由333个氨基酸组成，它的第 153、154位点的精氨酸一精氨酸序列又可被蛋白酶水解形成N端和C端两 个结构阈。N端结构阈高度保守，具有疏水性，可能是与其受体c—mpl结 合的功能区。C端结构阈高度糖基化，似乎起稳定循环TPO的作用。它可 能涉及到造血细胞(表达相应的受体)归巢或整合到骨髓微环境中。研究 表明，超过90％的基质细胞培养中普遍存在TPOmRNA的表达，骨髓基质 环境中造血干细胞的自我更新和巨核细胞造血的调控有关。TPO通过靶细 胞膜上特异性受体c—mpl介导的胞吞作用被靶细胞摄取，由于TPO的氨 基酸序列存在着数个蛋白酶水解位点，其中包含凝血酶的水解位点，在靶细 胞内凝血酶的作用下，TPO可被降解成为无完整生物学活性的多肽片断。 本研究选取25例再生障碍性贫血(AA)患者和50例急性白血病(AL) 患者(其中化疗前后各25例)作为病例组，以15例健康献血员作为正常对 照组，采用放射免疫竞争法测定其血清TPO浓度，以探讨其临床意义。 实验材料 一、药品与试剂：血小板生成素放免试剂盒(北京华英生物技术研究所 生产) 二、实验仪器：KDC一2046低温大容量离心机 ·l· GC-2016 1一放射免疫计数器 皿4—2低速离心机 4℃冰箱 实验方法 选取再生障碍性贫血(AA)和急性白血病(AL)患者作为病例组，其中 AA患者25人，AL患者化疗前及化疗后各25例，化疗前组为初诊患者，化 疗后指化疗后骨髓抑制期的患者。血清TPO的测定采用放射免疫竞争法， 放免试剂盒购自北京华英生物技术研究所，按说明书进行操作，用．y一放射 免疫计数器测定cpm值，读取TPO浓度。 实验结果 正常对照组的血清TPO浓度为84．23±14．90 pg／ml，AA患者组血清 TPO浓度为1864．63±356．66 4-404．16 (包括化疗前及化疗后)患者组血清TPO浓度为589．02 pg／ml， 4-258． 48pg／ml，明显高于正常对照组(P0．01)；而且化疗后亦明显高于化疗前 相关(叮=一0．844 细胞数呈负相关(1=一0．931P0．01)。 讨 论 体内外实验表明，TPO是对骨髓巨核细胞生长和血小板生成具有调节 小管和远曲小管及骨髓基质细胞合成，而红系和髓系祖细胞、巨核细胞及巨 嗜细胞则不合成TPO。研究表明，超过90％的基质细胞培养中普遍存在 TPOmRNA的表达。TPO产生后释放入血，在循环中保持一定的浓度。目 ．2． 性紫癜(I，IP)与无巨核细胞性血小板减少性紫癜的血清TPO水平，发现ITP 骨髓巨核细胞数量正常或增多而其血清TPO浓度显著升