刺参体腔细胞吞噬功能及体腔液抗菌活力的初步研究.pdfVIP

刺参体腔细胞吞噬功能及仲腔液抗菌活力的初步研究 摘 要 用抗凝剂柠檬酸钠、乙二胺四乙酸钠、肝素钠、草酸钠对刺参体腔细胞在体外条件 下的抗凝效果进行研究，筛选出1．5mg／ml乙二胺四乙酸二钠作为刺参体腔细胞最佳的抗 凝剂。 测定了多种条件下刺参体腔细胞吞噬酵母细胞过程中ROS的产生：(1)经体腔上 清调理后的酵母细胞能显著的增强刺参体腔细胞吞噬过程中ROS的产生，而杀死和未 杀死的酵母细胞对刺参体腔细胞吞噬过程中ROS的产生无显著影响；(2)高浓度刺参 生，而体腔上清液中无明显的RDS产生；(3)化皮病刺参体腔细胞吞噬酵母细胞时释 放的ROS少，而基础发光值较健康刺参体腔细胞高；(4)在22℃时刺参体腔细胞吞噬 能产生较多ROS；(5)比较NBT法和化学发光法测定刺参体腔细胞吞噬不同浓度酵母 三种农药在体外对刺参体腔细胞急性处理表明，除氧化乐果外，甲胺磷、敌百虫分 的产生，面在浓度较高(甲胺磷50—5000 m∥L)时抑制作用不 mg／L，敌百虫500．5000 明显，氧化乐果各浓度组对刺参体腔细胞吞噬过程中ROS的产生无明显增强或抑制作 用。孵育处理后，敌百虫在所设浓度下对刺参体腔细胞吞噬过程中ROS的产生都呈现 不同程度的抑制作用，甲胺磷、氧化乐果则出现了低浓度(甲胺磷50—100mg／L、氧化乐 mg／L、 5000mg／L)抑制吞噬过程和自身ROS产生的现象。 用不同浓度梯度募糖(寡聚半乳糖醛酸)、酵母多糖和脂多糖对刺参体腔细胞进行 急性和孵育处理，急性处理刺参体腔细胞时，使剌参体腔细胞吞噬酵母细胞过程中ROS 产生最多时的浓度分别为：100p．g／ml、50 1．tg／ml和5rtg／ml，而孵育组中，三种增强荆使 1119／ml。注射三种免疫增强荆后，不同时间抽取刺参体腔液测定体腔细胞吞噬酵母细胞 时ROS的产生，酵母多糖和腊多秸注射组中刺参体腔细胞吞噬产生ROS的最大值出现 在15d，寡糖注射组则出现在7d，增强效果为：脂多糖酵母多糖寡糖。 在相同温度和pF／值下，刺参体腔上清液与细胞裂解液的抗菌活力并不相同。用寡 糖急性处理刺参体腔液，其抗菌活力随寡糖浓度升高而增大，10lag／m1酵母多糖、 10099／ml脂多糖急性处理刺参体腔液，其抗菌活力达到最大值，用寡糖、酵母多糖、脂 达到最大抗菌活力。注射寡糖、酵母多糖、脂多糖后，刺参体腔液抗菌活力分别在 15d、15d、7d天时出现最高值，抗菌活力为：脂多糖酵母多糖寡糖。 关键词： 抗凝剂 ROS 农药 免疫增强剂 抗菌活力 ——————————————————————————————————————————————j!!—j!二———————————————————————————————————一—— ABSTRACT were inthis Sodium oxalate selected citrate、EDTA-Na2、HEPES、ammonium to the effectto invitro． coelomocytes studyanticoagulantStichopusjaponicus experiment as to wasselected coelomocytes． EDTA-Na2