Na2CO3胁迫下星星草叶绿素荧光动力学研究.doc

Na2CO3胁迫下星星草叶绿素荧光动力学研究 姓名:汪月霞 学号:03238 指导教师：孙国荣 扬州大学农学院 扬州大学农学院03级研究生 225009 星星草（Puccinellia tenuiflora）是一种盐碱耐性较强的禾本科牧草，经人工种植后能够在碱斑地上生长发育，对盐碱土壤具有改良作用[1-6]，近年来在盐碱草地改良和植被恢复实践中得到大面积推广应用，在星星草抗盐碱生理生态学机制方面进行了大量的研究工作[7-15]。但是在Na2CO3胁迫对星星草幼苗光合作用的影响方面的研究工作涉及较少 [16，17] 。众所周知，光合作用是植物最重要的生命活动之一，研究光合作用对盐胁迫的响应，对于阐明盐胁迫对植物的伤害机理和提高作物的抗盐性十分必要的。叶绿素荧光动力学是近年来在光合作用机理研究中发展起来的一种新型、快速、简便、精确且整体无损伤检测植物光合作用生理状况的新技术[18]。目前，植物体内叶绿素荧光动力学，在植物抗性生理学、生态学及农业方面的应用都有一些研究[19]，但对其与植物耐盐性关系尤其是碱性盐的研究很少[20-23]。因此，本文研究了Na2CO3胁迫对星星草叶绿素荧光的影响，以期揭示植物荧光动力学与其耐盐性的关系，为研究星星草耐盐生理机制以及植物的抗盐生理积累资料。 材料与方法 1.1实验材料 星星草种子由大庆市畜牧局草原站提供。 1.2材料培养及处理 用容积为600ml的塑料盆装满珍珠岩，加住Hoagland培养液至珍珠岩表面湿润，然后将星星草种子均匀撒在其上，于人工气候箱中培养，昼/夜温度为25℃/20℃，光照65ktx，相对湿度75％。待幼苗长到二叶期以上进行盐胁迫处理。将幼苗分为7组，分别用漏斗加10% Na2CO3 0，12，24，36，48，60，72ml至珍珠岩底层，并补充相应数量的Hoagland培养液到达原湿润程度，使7组塑料盆中Na2CO3溶液浓度分别为0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2（%）。 1.3渗透势测定 在盐胁迫处理7d后，采用5520型蒸压计渗压计(Hansatech公司)来测定培养基质和星星草叶片的渗透势 1.4相对电导率测定 按照Maribel L. Dionisio-Sese的方法[24]用326电导率仪测定星星草叶片的电导率。 1.5 叶绿素荧光参数的测定 在盐胁迫处理7d后，采用FMS2型便携式调制荧光分析仪(Hansatech公司)直接测定叶片叶绿素荧光动力学参数，包括光系统II(PS II)的最大光化学效率（Fv/Fm）、PSII实际光化学效率（ΦPSII）、电子传递速率（ETR）、PSⅡ有效光化学量子效率（Fv’/Fm’）、光化学淬灭系数（qP）、非光化学淬灭系数（qNP）；通过计算得出光系统II的潜在光化学效率(Fv/Fo)、光合天线吸收的光能被用于光化学反应的相对份额（EEP）、光化学速率（PR）、天线吸收的光能用于天线热耗散的相对份额（HD）、热耗散速率（HDR）。测定过程中叶片在暗适应夹中充分暗适应5min，然后用饱和脉冲方法进行测定，得到星星草叶片饱和光脉冲激发调制的叶绿素荧光参数，均为相对值。每处理重复6次测定，测定结果直接传输至计算机进行统计分析。 2数据统计分析 采用SigmaPlot2000统计软件进行相关分析和作图，图中数据均为6次重复实验的平均值。 3结果与分析 3.1星星草培养基质和叶片的渗透势与Na2CO3胁迫强度的关系 星星草培养基质的渗透势和Na2CO3胁迫的浓度呈极显著的负相关关系 (Y=-2.6014-4.1738X，P0.0001) （图1）；星星草叶片的渗透势和Na2CO3胁迫浓度也呈极显著的负相关关系(Y=-10.8517-9.7172X，P0.01) （图2），这说明Na2CO3胁迫的处理是比较准确的。 3.2 星星草叶片的电解质外渗率与Na2CO3胁迫强度的关系 星星草叶片电解质外渗率与Na2CO3胁迫浓度呈极显著的非线性关系(Y=0.0920-0.1199X+0.2007X2，P0.01)， 即Na2CO3浓度在0.4%以下时，电解质外渗率变化不大，甚至有减小的趋势，超过了这个胁迫强度电解质外渗率就急剧增大（图3），这与孙国荣（1997）[17]的研究结果相一致。 3.3 星星草叶片Fv/Fm与Na2CO3胁迫强度的关系 Fv/Fm是PSII在非胁迫条件下参数值在0.85左右，变化极小，不受物种和生长条件的影响。胁迫条件下该参数明显下降，表明胁迫条件下植物的原初光能转化效率降低[25，26]。本实验中，在不同浓度的Na2CO3胁迫下，星星草叶片的可变荧光与最大荧光的比值(Fv/Fm)与Na2CO3浓度呈显著的非线性关系。(Y=0.8013+0.0416X-0.0609X2, P0.05)，即Na2