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生物分析 生命的组成 生命基本活动 生物氧化还原(能量代谢) 信号转导 神经传递 生物大分子的结构 生物分子间的相互作用 生物反应过程的中间体 药物与生物大分子的相互作用 课程安排 绪论 2 生物大分子纯化技术 6 核酸分析 2 糖分析 2 蛋白质分析 2 酶法分析 4 免疫分析 6 第一章 概述 1、定义 生物分析化学是以分析化学理论、技术手段和方法为基础，以生物化学和分子生物学理论与技术为补充，以数学、物理学和计算机技术为手段，量测并获取生物/化学信息的前沿性交叉学科。 任务 生物活性物质的组成、含量、结构、形态等方面的信息； 发展获取上述信息的方法以及复杂生物物质的分离和纯化技术； 创制用于研究生命活性物质间相互作用的技术手段。 生物分析化学特点 A、生物分析化学研究的对象是生命活性物质，它既包括核酸、蛋白质等大分子，又含有种类繁多的活性小分子和调控分子； B、研究手段方面独特，生命体内的活性物质结构复杂、化学性能相似、生物活性各异，并且在生理条件下相互关联，对它们的分析测试常常要求是非破坏性的原位、活体分析； C、细胞是生物体的基本单元，生命活性物质在细胞内存在并随着空间、时间和外界刺激而运动和变化，因此生物分析化学必须研究微环境和时空中的多维信息。 D、生命过程研究需要同时获取大量各类分子相互作用的生化信息，因此，高速、高通量分析方法显得尤为重要。 2、分类 按分析化学习惯分类 化学分析法: 滴定分析法和重量分析法 仪器分析法: 光学分析法、电化学分析法、色谱分析法、质谱分析法和热分析法等 按分析方法使用功能分类 分离分析 结构分析 定量分析等 分离分析 定义：将复杂的生物体内物质分离成单一组分或组组分的一类方法，它主要包括电泳、色谱技术等。 特点：综合多种技术手段将分离与分析有机地结合在一起，避免间歇性操作，缩短工作时间，提高单位时间内的工作效率。 结构分析 定义：是通过合适的结构分析技术表征出生物分子中各基本组成单元的排列顺序和空间排布的位置。 常用方法： 一类是测定溶液状态下的分子构象，此类分析多用波谱分析法，如核磁共振法、圆二色谱法、激光拉曼光谱法、荧光光谱法、紫外光谱法等。 另一类是测定分子的晶体结构，如X-射线衍射分析法和小角中子衍射法。 定量分析 特点：由于样品量小，被测组分含量极微，因此需要选择灵敏度高、准确、快速和简便的测定方法；同时不少生物物质具有近似的功能团，其测定方法要求突出高度的专一性。 常用的测定方法主要有：光谱法（含紫外-可见光谱、荧光光谱等），电化学方法，生物活性检测法，免疫分析法和生物传感器等类别。 近年，定量分析方法朝着将分离与分析融为一体的快速仪器分析方向发展，如配备有高灵敏度检测器的芯片技术。 3 分析特征 生物物质种类繁多，各类物质的分析也各有其特点。我们主要讨论蛋白质、核酸的分析特征。 从适合分析的角度看，蛋白质、核酸等生物大分子主要表现为生物活性、光学活性、电化学活性和分离特征。 蛋白质 蛋白质含有酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等芳香环基团，其环状结构可以产生π-π*跃迁，因而大多数蛋白质在280nm处有最大吸收峰。 b. 红外光谱 红外光谱主要是用于研究配体的结合和氢键相互作用，并在特定的环境中探测分子的构象。 核酸的红外光谱特征主要表现在其杂环基团的振动，如嘧啶环。 蛋白质的红外光谱是肽键、侧链基团、二硫键等的不同振动方式所致。 c 荧光特性 荧光技术是一种高灵敏度的分析测试方法，其质量检测限可达到10-12g，利用此技术可检测超痕量的生物活性物质，是目前生物分析中研究最多、应用最广的方法之一。同时，由于荧光发射的时间极短，可用来研究生物分子的反应动力学，跟踪反应和分子重排过程。 核酸 核酸的内源荧光很弱，不能直接利用荧光技术研究核酸的结构与性质。常用的方法有荧光衍生法和小分子荧光探针增强法。 蛋白质 在蛋白质分子中，能发射荧光的氨基酸有色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)以及苯丙氨酸(Phe)，个别蛋白质分