拉曼光镊技术及其在单细胞研究中的应用.pdfVIP

第七届全国液体和软物质物理学术会议摘要 OC22 拉曼光镊技术及其在单细胞研究中的应用+ 叶安培1，张勇2，马宏飞1。熊宇乐1 纳米器件物理与化学教育部重点实验室，J￡京大学信息科学技术学院．10087 2北京生物医药研究所，100091 Email：vap啦ku．edu．cn RamlL,1光谱是分析物质化学组分和结构的重要检测技术，在化学，材料科学，生物医药， 食品卫生．环境检测等诸多领域发挥着独特作用，并不断显现出更强大功能。Rama／i光谱具 有化学指纹识别的功效，与荧光光谱有显著区别，在生物医学检测方面有独特的优势。与荧 光光谱相比Raman光谱不受水的吸收影响，不需要对样品进行复杂的荧光标记，谱线宽度比 荧光光涪窄10-100倍，片j红外激光激发还IT以有效地消蜍生物样品的自发荧光十扰，向叫L 乎不受“光漂白”效应的影响。特别是显微Raman光谱，对样一讯需錾毓很小，空间分辨书很 光谱信号强度十分微弱(比荧光弱5．7个量级)，用Ramari光谱对单个活细胞进行检测是 挑战性的难题。因为细胞内化学成分十分复杂，单细胞中的每种化学成分含量有非常有|I|‘i， 信号极其微弱．以致难以检测。特别是对于悬浮细胞由于其热运动，使激发光难以对准，从 而更难检测。通常的测量方法是先将悬浮细胞用化学方法固定在玻片上．然后进行测量。我 们研制的单分子与纳米生物光学检测系统，将激光光镊与微区Raman光谱有机地耦合在了 一起，将激光光镊对细胞的操控与Raman光谱的检测功能结合起来构成所谓的“拉曼光镊系 统”，很好地解决了上述问题。实验中，我们先用一束较强的红外激光(光镊)束缚并悬浮 固定细胞，使其脱离波片等环境干扰，然后，用另一束很弱的可见激光进行激发。这样既解 决了悬浮细胞不易对准激发的问题，同时也排除了玻片对细胞Raman散射信号的影响。更 的空间分辨率，同时为进一步活细胞显微Raman成像研究奠定了基础。 ． ． -。 ．-p, 齐 f≮并烹i_一：‘二j=二 墓羞茜篓澄基鏊毫 强l大自鼠m细胞e．ar啪光谱。t红卅光镊捕获T．用另一日见撤光啦发的m细胞R帅∞光带．b单一散光作为光镊和 激萤光源时R鲥帅光谱，cm目胞贴在氧璇H±的鼬m蛐光蒲 第七届全国液体和软物质物理学术会议摘要 利用该技术我们首先测量了单个大鼠血红细胞的Raman光谱，得到与文献一致的结果。 来自不同正常人的血红细胞，正确率达80％以上。为血液痕量分析提供了新的技术。 细胞的平均，并扣除了背景，信号采集时间30秒钟． 表1．单个U937活细胞的Raman光谱及初步指认 145