黄酮联合阿霉素协同诱导HL60ADR细胞凋亡机制的研究.pdfVIP

诊断学理论与实践2014年第 13卷第 2期 ·159· · 论 著 ． 黄酮联合阿霉素协同诱导 HL60／ADR细胞 凋亡机制的研究 陈芳源， 张曼胡， 蔡佳翌 ， 沈莉菁 ， 钟济华 ， 曹兰芳 (上海交通大学医学院附属仁济医院血液科 ，上海 200127) 摘【要】 目的：探究黄酮在体外对多药耐药细胞系HL60／ADR的影响及联合阿霉素后对细胞生长抑制和凋亡的 作用机制，探讨中药在白血病化疗 中扶正、增效的可能性。方法 ：用 CCK．8法检测黄酮和阿霉素对 HL60／ADR细胞生 长的抑制作用 ；用流式细胞仪检测药物作用后 的细胞凋亡率 ，并在光镜下观察细胞形态变化 ：蛋 白印迹法检测药物 作用后凋亡信号通路蛋 白表达的情况；流式细胞仪检测药物作用后HL60A／DR线粒体跨膜电位的变化。结果：黄酮 能显著抑制 HL60／ADR细胞的增殖 ．且其抑制细胞增殖效应呈现浓度一时间依赖性 ：不 同浓度的黄酮及联合阿霉素 1．5xIg／mL(20％~制浓度即IC 值)后对细胞的抑制作用更明显 ，具有协同和相加作用。75Ixgm／L和 100 咖 L黄酮 能促进HL60／ADR细胞凋亡 ．而黄酮联合阿霉素的促凋亡作用更显著。蛋 白信号通路研究显示 ，单药黄酮及两药联 合能使 HL60／ADR细胞线粒体膜电位下降，抗凋亡蛋 白Bcl一2、Bcl—XL表达明显下调 ，促凋亡蛋 白Bim、Bad、Bax明显 增加 ，激活 caspase途径 ：同时磷酸化的P-JNK蛋白表达水平升高，而P．ERK明显下降。结论 ：黄酮联合阿霉素可通过 线粒体跨膜 电位的下降．依赖 caspase活化调控 Bc1．2家族 中Bim、Bad和 Bax蛋 白表达 ，下调 ERK细胞保护通路并 上调JNK应激相关通路 ．最终协 同抑制 HL60A／DR细胞增殖并诱导其凋亡。 关键词 ：黄酮； 阿霉素 ： 凋亡 ； HL60／ADR细胞 中图分类号：R733．7 文献识别码 ：A 文章编号：1671．2870(2014)02．0159．07 DOI：10．39690．issn．1671—2870．2014．02．011 Studyonmechanism ofapoptosisinducedbycombinationofflavonoidandadriamycininHL60／ADR ceHs CHEN Fangyuan,ZHANGMinyue，CAIJiayi，SHENLijing,ZHONGJihua,CA0Lanfang．DepartmentofHematology,Re Hospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine，Shanghai20012ZChina A【bstract]Objective：Tostudytheeffectandmechanismofflavonoidandflavonoidincombinationwithadrimycin onmultidrugresistantHL60／ADR cells in vitro for exploring thepossibleeffectofChinese traditional medicine in leukemiachemotherapy．M ethods：HL60／ADR cellsweretreatedwithadriamycin，flavonoidandflavonoidcombinedwith adriamycin，respectively．CCK一8kitwasusedtodetectthegrowthinhibitioneffectonHL60／ADRcells．Apoptosisrateand