郏县红牛超数排卵及胚胎冷冻保存的研究.pdfVIP

郏县红牛超数排卵及胚胎冷冻保存的研究 李志钢1’2，王新庄H，石奎林。}秦瑞峰k2，石育铭2翟明胜1，丁丹丹。，刘远哲1 1河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002；2平顶山郏县红牛繁育中心，河南平顶山467000 摘要：【研究目的】本试验基于郏县红牛的品种保护工作，是以邦县红牛为研究对象，对郏县红牛进行同期发情和 超数排卵，探讨生产中郏县红牛超数排卵及胚胎冷冻的方法：【方法】挑选75头郏县红牛进行分组分批进行同期发 情及超数排卵：【结果】试验所得母牛同期发情率为92％，供体经超排处理获得头均黄体数9．89+9．11个，头均获 可用胚数4．53+4．14枚，试验共超排郏县红牛75头，共获得可用胚胎303枚，经程序化冷冻进行保存。【结论】研 究发现，CIDR+PG法处理比PG二次法处理供体牛的同期发情效果好，但是PG二次法具有更高的性价比，更便于 生产；应用促排卵素(FSH)递减法连续肌注四天进行超排的方案对郏县红牛也是可行的，进口促卵泡素(FSH) 与国产促卵泡素(FSH)超排所获可用胚胎数差异不显著。 关键词：郏县红牛；同情发情；超数排卵；可用胚胎：冷冻保存： 1引言 郏县红牛是我国著名的役肉兼用型地方黄牛品种之一，是在特定的生态环境条件下经过农民世 代精心选育而形成的优良地方品种，其耐粗饲，抗病性、适应性强，繁殖率高，是优秀的肉牛杂交 母本，曾多次受到国内外有关专家的肯定，是发展肉牛产业、培育优良高档肉牛品种的重要品种资 源；且郏县红牛的肉质细嫩、香味浓郁，其肉质特点倍受国内外专家重视。目前受社会大环境的影 响，农业机械化程度的提高，原来农村家家户户养红牛的情形没了，郏县红牛原来群选群育的选育 环境消失了。2006年以来郏县红牛存栏量逐年下降，加之自上世纪90年代开始大力推广牛的人工 授精技术以来，国外肉用品种大量引入，如夏洛莱、利木赞、安格斯、西门塔尔等肉牛品种，杂交 改良后肉用性z日,．匕e_,，4KEt明显，杂交进程很快，但由于杂交面混乱，也没有系统的选育，反而导致了本品 种质量下降。郏县红牛作为役肉兼用品种，与国外肉牛品种相比，其生长较慢，产肉性能较低，受 经济利益驱使，郏县红牛配种需求少，但随着人们生活水平提高，肉牛屠宰量上升，郏县红牛数量 锐减，尤其优秀种公牛极度缺乏，郏县红牛的品种保护工作显得日益严峻。 目前牛保种最经济、最有效、最实用的方法是建立郏县红牛的胚胎基因库。建立胚胎基因库的 关键技术是同期发情、超数排卵和胚胎冷冻保存，该技术早已在奶牛、水牛上得以广泛的应用与推 广，应用于肉牛的报道也屡见不鲜，不少地方品种如南阳黄牛、秦川牛、晋南牛、延边牛等品种的 同期发情与超数排卵也已有报道。本研究拟具体探索生产实际中的郏县红牛同期发情、超数排卵及 胚胎冷冻保存，以利于郏县红牛胚胎基因库的建设，保护郏县红牛品种的同时，也为郏县红牛胚胎 的未来商业化运作做个铺垫。 2材料与方法 2．1试验地点、时间 试验时间：2010年12月至2012年12月 试验地点：河南省平项山市舞牛畜禽良种繁育公司郏县红牛繁育中心 试验基于场内生产工作。 2．2试验材料 2．2．1试验动物 纯种郏县红牛供体母牛共计75头， 2010年12月30头，均为头胎经产牛， 2011年l1月20头，均为头胎经产牛， 2012年12月25头，均为头胎经产牛。 试验期间，所有参试牛均是提前一个月检查，确定为健康，性周期正常，无生殖器官疾病，膘 情适中；所有参试牛全部舍饲，以青粗饲料搭配精料饲喂，并提前一个月进行强饲，同时补充维生 素和矿物质。 所用细管：20头郏县红牛特级公牛的细管，精液均采自平顶山市葬牛畜禽良种繁育公司郏县 红牛繁育中心，活力在O-35以上。 2．2．2主要仪器、设备 磁力搅拌器：金坛市大地自动化仪器厂 胚胎冷冻仪：日本产CL--5500 实体显微镜：北京泰克仪器有限公司 xTL一1 显微镜恒温板：金坛市大地自动化仪器厂 恒温水浴锅：北京中兴伟业仪器有限公司 牛非手术采胚器械：日本产 2．2．3主要试剂、药品 Cat．No．21300—025 磷酸盐缓冲盐水(PBS)：GIBCO No．050411 氯前列烯醇(PG)：上海计划生育科学研究所，0．2rag／支Lot