猪线粒体DNA多态性与中国地方猪种起源分化的关系.pdfVIP

遗 传 学 报，25(4).322--329,1998 Acta Genetica Sinica 猪线粒体DNA多态性与中国地方猪种 起源分化的关系 黄勇富’,2张亚平1,01邱祥聘2 曾凡同2 肖永作2 (1中国科学院昆明动物研究所细胞与分子进化开放研究实验室 昆明 650221) (2 四ill农业大学动物科学技术学院 雅安 625014) 摘要 用24种限制性内切酶分析了我国21个具代表性地方猪品种、l个引进品种和2个来自 中国和越南的野生近缘种mtDNA的RFLP。结果表明：在74个个体中检出的32种限制性态 型可归结成7种单倍型，其间的差异主要来源于少数几个限制性位点的点突变；地方猪种4种 单倍型间的平均遗传距离为0.143%，遗传多态程度 二（值）仅为0.007%，说明遗传多样性非常 贫乏，提示中国地方猪种可能起源于一个野猪亚种。 关键词 猪，线粒体DNA，限制性内切酶，遗传分化 分类号 Q347 高等动物线粒体DNA(mtDNA）是共价闭合的双链分子，16.5kb左右，每个细胞中有 1000-10000个拷贝。mtDNA呈母系遗传，且不发生重组；其基因组织结构简单、稳定，但 碱基突变率很高，进化速率约为单拷贝核DNA的5-10倍。故使mtDNA限制性片段长度 多态性 R（FLP）分析成为动物母系起源和遗传多样性研究的特别有效的方法 ］〔。‘ 我国幅员辽阔，气候和地形复杂多样，而且各地区农业生产条件和社会经济条件差异 悬殊，为家猪品种的形成提供了不同的条件和提出了不同的要求，经过劳动人民长期的选 育形成了48个优良地方品种[2]［。如此丰富的猪品种多样性，不仅是我国也是世界动物资 源开发利用的丰富宝库。目前，对中国地方猪种遗传多样性的认识大多是形态学水平的 记述，虽有一些细胞遗传学和生化遗传学方面的研究(3-［51，但所涉及的品种较少。至于分 子水平的遗传多样性研究才刚起步6【-8]，远远落后于国外同类研究9[,［10]。而关于中国家猪 起源问题的研究虽在考古学、形态学和细胞遗传学等方面取得了一些有用的证据[2,3]，但 结论尚不明确和缺乏说服力。因此，本文采用mtDNARFLP技术，以欧洲猪种为外群，对 我国地方品种和野生近缘种的遗传多样性进行分析，以探讨我国家猪的起源和遗传分化， 进而为猪的遗传育种工作提供重要的背景资料。 1 材料和方法 1.1动物来源 共分析了74只个体 表（1)类（型和品种的划分按 《中国猪品种志》的标 准2]［）。 本文于1996-08-13收到，1996-12-26修回 国家自然科学基金 3（9400070)、杰出青年科学基金、云南省科委重点基金及 “二百人计划”资助项目 ① 联系人 4期 黄勇富等：猪线粒体DNA多态性与中国地方猪种起源分化的关系 323 1.2 试剂 APaI,AvaI,BamHI,BelI,BglI,Bgl1I,ClaI,DraI,EcoRI、 EcoRV、HaeII、HindIII、HpaI、KpnI、PstI、PvuI、PvuII、SacI、SalI、ScaI、naI、 StuI,XbaI和XhoI等24种识别六碱基序列的限制性内切酶，购 自华美生物技术公司； RNaseI为德国BoehringerMannheing公司产品；SDS为Servi进口分装；其余为国产分析 纯。 1.3 mtDNA的提取和纯化 mtDNA的提取和纯化按王文和施立明改进的方法[81进行。 1.4 限制性内切酶消化和琼脂糖凝胶电泳 参照Lan和Shi的方法[111进行。 1.5 数据分析 表1 动 物 来 源 Table1Collectionlocalitiesofexperimentalanimals 类型 Type 品种 Breed 类群 Population 头数 Number 采集地 Collectionlocality 华 北 型 民 猪 大 民猪 2 辽宁 庄河 North