转导引起基因重组的教学分析.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)19(6):34一361997 .A 传 学 4欠 学 ． 转导引起基因重组的教学分析 张 霞 朱开平 新（疆石河子大学师范学院生化系，石河子 832003) AnalysisofGeneticRecombinationThroughTransduction ZhangXia ZhuKaiping (DepartmentofBiologyandChemistry,NormalCollegeofShiheziUniversity,Shihezi832003) 转导(t（ransduction)是指通过缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞DNA片段携带到受体细胞中，使后者获得前者 部分遗传性状的现象。根据传递供体DNA片段的噬菌体是完全缺陷的还是部分缺陷的，以及受体细胞接受的 DNA片段是供体细胞的任何一个基因、相邻两基因还是特定基因，可将转导分为普遍性转导、共转导和局限性 转导，在此对几种转导过程进行分析： 1普遍性转导g（eneralizedtransduction) 这是一种通过完全缺陷噬菌体或（称假噬菌体）将供体菌中的任何基因包（括质粒）携带进人受体菌细胞中，或 者与受体菌’染‘色体”同源区段配对，经双交换整合在”染色体，’上、使受体菌实现各种性状的转导；或者无配对、交 换现象。鼠伤寒沙门氏杆菌(S.typhimurium）的转导中，以野生型菌株为供体菌，营养缺陷型突变菌株 [LT22A(trp-)]为受体菌，P22噬菌体作为转导媒介。 1.1傻染供体菌，释放裂解物的过程分析 当P22噬菌体在供体菌细胞内发育时，寄主”染色体”断裂，待噬菌体成熟时，释放的噬菌体有两种可能：一种 是绝大部分是完全正常的P22噬菌体，即P22噬菌体的蛋白质外壳包裹着P22的核酸，这种情况对基因重组无意 义。另一种是P22噬菌体外壳将与噬菌体头部DNA芯子相仿的、大约占供体菌 染色体”1％ 的供体菌DNA片 段误包其中，形成了完全不含噬菌体本身DNA的假噬菌体，即其中的DNA片段上或者带有。厂基因，或者不带 有。P十基因。是否带有与受体菌营养缺陷基因相应的同源基因，对基因重组意义不同。 1.2裂解物再感染受体菌，发生基因重组的过程分析 为使带有tip十基因的假噬菌体有机会侵染受体菌，必需将少量从供体菌释放出的裂解物与大量的受体菌群混 合，使感染复数小于 1，即每个受体菌上最多只有一个噬菌体或（是P22，或是假噬菌体）侵染，然后涂布于基本培养 基上过夜培养，则会出现以下情况： 1.2.1受体菌被P22噬菌体侵染。因受体菌是营养缺陷型，所以在基本培养基上无法生长，即无菌落。 1.2.2受体菌被不带有tip十基因的假噬菌体侵染。假噬菌体中的DNA片段进人受体菌细胞，也可能发生一次双交 换，但因同源区段携带的基因均为野生型，对基因重组无意义、且导人的DNA片段上的基因与受体菌的缺陷基因 不相对应，受体菌的tip＋基因无法得到补偿，因此这种受体菌也无法生长，无菌落。 1.2.3受体菌被带有tip基因的假噬菌体侵染。假噬菌体中无P22的任何基因，不会使受体菌细胞发生溶源化，也 不会显示其免疫性，更不会裂解和产生正常噬菌体，但其上带有与受体菌缺陷基因相对应的野生型基因。导人的 DNA片段大约有 1/10能与受体菌’染‘色体”的同源区段配对，经一次双交换整合在受体菌 ’染色体，’上，即受体菌 6期 张 霞等：转导引起基因重组的教学分析 35 trp一基因被供体菌，rp＋基因所替代，实现了基因重组，并随．’染色体”的复制而复制，从而使重组的基因得到表达，它 们在基本培养基上能够生长，形成菌落。这种方式就是完全普遍性转导c（ompletetransduction)。这种转导对基因 重组有意义。但大多数情况下，导人的DNA片段没有与受体菌“染色体”的同源区段配对和发生交换，即未整合在 受体菌．．染色体”上，因而它不能复制。当受体菌分裂成两个时，只有一个细菌获得了此野生型基因，另一细菌则未 获得此基因，仍为缺陷型细菌，只不过它是由一个野生型亲本菌分裂产生的细菌，细胞中还有足够的酶使它分裂几 次，最后产生若干个不能在基本培养基上继续分裂的细菌．这样，许多细菌