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DBS22
吉 林 省 地 方 标 准
DBS22/018—2013
食品安全地方标准
鲜 (冻)畜肉中鸭源性成分的定性检测
PCR 方法
2013-10- 08 发布 2013 - 10 - 08 实施
吉林省卫生厅 发 布
DBS22/018—2013
前 言
本标准的附录A为资料性附录。
本标准主要起草单位:吉林省产品质量监督检验院、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、吉林
农业大学。
本标准主要起草人:史艳宇,刘金华,邴炜,华蕾,王莹,金哲勇,张庆波,吕航,赵立群。
I
DBS22/018—2013
食品安全地方标准
鲜 (冻)畜肉中鸭源性成分的定性检测 PCR 方法
1 范围
本方法规定了鲜 (冻)畜肉中鸭源性成分的PCR定性分析方法。
本方法适用于生鲜、冷冻畜肉中鸭源性成分定性检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本 (包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测
3 术语和定义
鸭源性成分 duck-derived materials
鸭种属特异性DNA片段。
4 原理
对样品进行DNA提取,通过PCR扩增,检测鸭特异性基因片段。
5 试剂和材料
除特别说明以外,所有试剂均为分析纯,水为按照GB/T 6682规定的一级水。所有试剂均用无DNA
酶污染的容器分装。
5.1 鸭源性成分检测用引物 (对)序列为:
上游引物:5’- CATCTATCCTGCTAGCCGCC -3’
下游引物:5’- GGCTTGAGTGGAAGAATGCC -3’
5.2 Taq DNA 聚合酶。
5.3 限制性内切酶:Stu I 酶。
5.4 dNTP:dATP、dCTP、dGTP、dTTP。
5.5 食物基因组 DNA 提取纯化试剂盒。
5.6 分子量标记:100 bp~3 000 bp DNA Marker。
5.7 CTAB 裂解液:1%CTAB (cetyltrithylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),0.05 mol/L
Tris-HCl (pH8.0)[Tris-:tris (hydroxymethyl) aminomethane,三 (羟甲基)氨基甲烷],0.7 mol/L
NaCl,0.01 mol/L EDTA (pH8.0)( ethylen
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