DNA分子标记技术及其应用89659.pdfVIP

维普资讯 安徽农业科学。JournalofAnhuiAg,i．Sci．20O7，35(24)：7422—7424 责任编辑 孙红忠 责任校对 李洪 DNA分子标记技术及其应用 白玉 (首都师范大学生命科学学院，北京lo0037) 摘要 对RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR等常用的DNA分子标记技术以及其他几种新兴的标记技术(SNP、ESF等)的原理、特点进行了综 述，认为利用DNA分子标记技术来鉴定品种具有客观、准确、快速的特点，且可鉴定形态上很难或者根本无法鉴别的品种。分子标记技 术已成为品种鉴定技术领域的主流和发展趋势。 关键词 DNA分子标记；Rn ；RAPD；6LP；SSR；ISSR；品种鉴定 中图分类号 Q503 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2007)24—07422—03 遗传标记(Geneticmarker)是指可追踪染色体、染色体某 的遗传信息。⑥DNA分子标记技术简单、快速、易于自动化。 一 节段或者某一个基因座在家系中传递的任何一种遗传特 ⑦提取的DNA样品，在适宜条件下可长期保存，这对于进行 性。它具有2个基本特征，即可遗传性和可识别性。因此， 追溯性或仲裁性鉴定非常有利。 生物中任何有差异表型的基因突变型均可作为遗传标记。 因此，DNA分子标记可以弥补和克服在形态学鉴定及 同 随着遗传学的不断发展，遗传标记的种类和数量也不断增 工酶、蛋 白电泳鉴定中的许多缺陷和难题，因而在品种鉴定 加。目前，应用较为广泛的遗传标记有形态标记(Morphologi． 方面展示了广阔的应用前景。 calmaker)、细胞标记 (Cytologicalmaker)、生化标记 (Biochemical 1．1 第 1代分子标记 maker)和分子标记(M0llecularmaker)_l_。 1．I．1 RFLP标记技术。1980年Botesin提出的限制性片段 形态标记指植物的外部形态特征(矮秆、紫鞘、卷叶等)； 长度多态性(Restrictionfra~entlengh【polymorphisms，RFLP)可 细胞标记主要是染色体的核型(染色体数 目、结构、随体有 以作为遗传标记，开创了直接应用DNA多态性的新阶段，是 无、着丝粒位置等)和带型(C带、N带、G带等)；生化标记主 最早应用的分子标记技术 4【j。RFLP是检测DNA在限制性内 要包括同工酶和等位酶标记。这 3种标记都是基因表达的 切酶酶切后形成的特定 DNA片段的大小，反映DNA分子上 结果，是对基因的间接反映，标记数 目有限，多态性较差，易 不同酶切位点的分布情况，因此DNA序列上的微小变化，甚 受环境条件的影响。而分子标记是直接在 DNA分子上检测 至 1个核苷酸的变化，也能引起限制性内切酶切点的丢失或 生物间的差异，是在 DNA水平上遗传变异的直接反映。分 产生，导致酶切片段长度的变化。RFLP标记的等位基因具 子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的 有共显性的特点，结果稳定可靠，重复性好，特别适应于构建 一 种较为理想的遗传标记形式，它以蛋白质、核酸分子的突 遗传连锁图。但是，在进行RFLP分析时，需要该位点的DNA 变为基础，检测生物遗传结构与其变异 2。分子标记技术从 片段做探针，用放射性同位素及核酸杂交技术，既不安全又 本质上讲，都是以检测生物个体在基因或基因型上所产生的 不易 自动化。另外，RFLP对DNA多态性检出的灵敏度不高， 变异来反映生物个体之间的差异。DNA分子标记能对不同 RFLP连锁图上还有很多大的空间区E2j。 发育时期的个体、任何组织器官甚至细胞作检测，数量极多， 1．1．2 RAPD标记技术。为了克服m1P【技术上的缺点， 遍及整个基因组，多态性高，遗传稳定，不受环境及基因表达 Williams等 于 1990年建立了随