实时监测ghrp对心肌细胞内ca调控的双标记方法.pdfVIP

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2017-09-03 发布于重庆
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实时监测ghrp对心肌细胞内ca调控的双标记方法.pdf

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　 ·论　　著 · J M ed R e s, A ug 2007 , Vo l. 36 No. 8　　 2 + 实时监测 GHRP对心肌细胞内 [ Ca ] i和 NO 调控的双标记方法研究李梅秀　王艳茹　曹济民　田国忠　赵玲辉 2 + 摘　要　目的　探索实时监测 GHRP对心肌细胞内 [ Ca ] i和 NO 调控的双标记方法 ,为研究 GHRP对心脏直接保护效应机制提供新方法。方法　用改良的 L angendorff 恒流灌注仪系统和酶解法急性分离 SD 成年大鼠心肌细胞 ,在 L SCM 下分别以 2 + 2 + Ca 探针 Rhod - 2 /AM 和 NO 探针 DA F - FM /DA 对心肌细胞内 Ca 和 NO 进行双标记并观察 GHRP 即时刺激对两者的调控影 2 + 响。结果　在 L SCM 下心肌细胞内 Ca 呈红色荧光 ,NO 呈绿色荧光 ,两者双标记后呈现黄绿色荧光 , GHRP使红色荧光出现瞬时增强后又迟缓地回降 ,绿色荧光强度没有明显变化 ,双标记下 GHRP对两者的调控同单标记结果。结论　L SCM 下实验中设计的 2 + 2 + 双标记方法能实时监测成年大鼠心肌细胞内 Ca 和 NO 存在及 GHRP对两者同一时相调控作用 ,引起 [ Ca ] i两个时相的变化 , 而对 NO 信号系统未见明显影响。关键词　心肌细胞　细胞内游离钙离子浓度　NO　双标记　GHRP　L SCM 2 + To Explore the D ouble - labeling M ethod of M on itor ing the GHRP Regula tory Function on [ Ca ] i and NO on Rea l T im e in Card iom yocytes L iM eix iu, W ang Yan ru, Cao J im in, T ian Guozhong, Z hao L ing hu i. B as ic M ed ica l Colleg e, J iam us i Un ivers ity, H eilongj iang Under L SCM. 　 15400