海滨木槿粗提物体外抗肿瘤作用的研究.pdfVIP

海滨木槿粗提物体外抗肿瘤作用的研究.pdf

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专斟 艘婴舞器嚣桊嚣燃篡淼篓蒜讨厶灞藤2012海峡两摩曩CSNR全国第10慝中药及天然药物资潦学术研讨会灞鞫鳓黪 海滨木槿粗提物体外抗肿瘤作用的研究 onAnti—leukaemiaActiVitiesofCrudeExtractsof胁6括cⅣs五日,”口6D StlJdy 王奇志,王海婷,管福琴,陈雨,孙浩,赵友谊,冯煦,王鸣 (江苏省中国科学院植物研究所,江苏省药用植物研究开发中心,江苏,南京210014) 摘要 目的:研究海滨木槿不同部位不同溶剂的粗提物体外抗HL一60活性组分的筛选。方法:采用超声辅 助提取法分别获得了海滨木槿根、茎、叶的正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇和水的粗提物,采用MTT法检测 粗提物对HL一60的细胞毒作用,阳性对照为5.Fu。结果:叶的粗提取物能明显抑制HL.60的生长,茎的粗提物也有 一定的抗肿瘤活性。结论:海滨木槿叶的甲醇或乙酸乙酯提取物值得进一步细分并深入研究抗癌活性化合物。 关键词海滨木槿;不同部位不同溶剂提取物;人急性早幼粒白血病细胞株HL一60 20世纪80年代,由浙江农业大学范文涛教授采集该树的标本并将其中文名定为海滨木槿,又名海 槿、海塘木、海塘树。锦葵科木槿属植物全世界200余种分布于热带和亚热带地区;我国有24种 和16变种,分布于全国各地。常见的品种有黄槿(胁6西c淞ff,f口cP甜s)、木槿CHs砂肠c淞)、大麻槿阻 c彻”如加“s)、朱槿(H加s∞加鲫括)、玫瑰茄(H J口6咖a弦)、木芙蓉(-H朋“彻6f,西)、台湾芙蓉阻 勉iw口珂e丹s担)、海滨木槿(觑6括£埘办口珑口6D)等。本属植物多数供药用,对治疗跌打损伤、阴囊湿疹、 皮肤癣、痢疾腹泻、痔疮出血、心脏和神经系统疾病以及各类炎症有良效,药理作用有抗炎抑菌 作用[1-2]、抗氧化作用[341、抗肿瘤作用‘5-71、抗生育作用[8-9】。 海滨木槿植物资源丰富,高效无毒或低毒,有望成为天然抗癌活性药物,国内外尚未有文献 报道有关海滨木槿的化学成分及活性研究,本实验室研究发现海滨木槿叶的提取物有很强的抗癌 活性,因此,为了综合利用海滨木槿的植物资源,本文运用MTT法研究海滨木槿不同部位不同溶 剂提取物的体外抗癌活性,为深入研究海滨木槿叶提取物中的活性成分及抗癌机制奠定基础,为 海滨木槿广泛应用于医药和开发新型保健品提供参考。 1实验材料 1.1药材 海滨木槿于2010年采自浙江省宁海县青珠农场,经江苏省中国科学院植物研究所袁昌齐研究 员鉴定,标本现存放于江苏省中国科学院植物研究所药用植物研究开发中心,CNBG/2010/Hh/1。 1.2试剂 人类急性髓细胞性白血病细胞株HL一60购于中国科学院细胞库,胎牛血清购自Hvclone公司。 1.3仪器(略) 2实验方法 2.1海滨木槿不同部位不同溶剂提取物的制备f略) 2.2细胞培养 HL一60细胞培养于含有10%胎牛血清、 L一谷 100u/mL青霉素、100¨g/mL链霉素及1mmol/L 氨酞胺IMDM培养液中,37℃、5%C02饱和湿度培养箱中孵育。隔天传代。 2.3不同溶剂提取物对肿瘤细胞生存活力的影响 本文用MTT法测定上述粗提物对肿瘤细胞的抑制效应。取对数生长期的HL一60细胞,在96 蔼熟 201 瞿婵蕊舞嚣蒜嚣篇篇慧篇筝嚣滁蔫麟2海峡两岸譬CSNR全国第10居中药及夭然药物资潦学术研讨会瀚舅嘲霹 孔细胞培养板中铺上细胞,每孔100¨L共l×104个细胞,然后用100“g/ml的待测样品处理,每个 h后,向各孔中加入MTT(5 浓度重复3孔,在37℃、5%C02培养箱中孵育。24 mg/mL,PBS), 培养箱继续孵育,4小时后每孔加入100uL三联液(10%sDS,0.12molHCL),培养箱中孵育过 夜。用酶标仪检测吸光值,检测波长为570nm,参考波长690nm,并计算细胞存活率。 细胞存活率%=(A570加药组一A690

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