第10章DNA的生物合成.ppt

11 12 第三篇 第三篇 基因信息的传递 基因（gene）：生物活性产物编码的DNA功能片段，以碱基排列顺序贮存遗传信息。由Johannsen于1909年首先提出。 中心法则(central dogma) ：1958年F.Crick提出。1970年H.Temin发现逆转录现象，补充中心法则。 第十章 DNA的生物合成 ? DNA的生物合成有DNA复制和逆转录两种方式。 DNA复制（ DNA replication）是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板，按照碱基配对原则指导合成子链DNA的过程。 ? 第一节????复制的基本规律 ? DNA复制的方式为半保留复制 (semi-conservative replication)? DNA复制的形式为双向复制 (bidirectional replication) DNA复制的过程为半不连续复制 (semi-discontinuous replication) ?一、半保留复制 （semi-conservative replication）? DNA复制时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板，按碱基配对规律合成与模板互补的子链，形成子代DNA双链，其中一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则是合成的，故称半保留复制。 半保留复制的实验依据 1958年，Messelson 和stahl 用实验证实。 1. 细菌在含15NH4Cl的培养液中培养若干代，密度梯度离心分离出DNA是含15N的重DNA。图 2. 把含15N-DNA的细菌放14NH4Cl培养液中培养，子一代DNA是中等密度DNA 。图 3. 继续培养出子二代，其DNA是中等密度DNA与普通DNA各占一半。图 半保留复制的意义 按半保留复制方式，子代保留了亲代DNA的全部遗传信息，体现了遗传过程的相对保守性。 遗传的保守性是相对的，而不是绝对的。自然界还存在着普遍的变异现象。 二、 双 向 复 制(bidirectional replication)  DNA复制时，从复制起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。图 原核生物是单复制子双向复制。其环形DNA为单复制子，只有一个复制起始点。 图 真核生物是多复制子双向复制。其线形DNA有多个复制起始点，形成多个复制子。图 （复制子是独立完成复制的功能单位，一个复制起始点起始的DNA复制区域称为复制子replicon ）。 第二节???DNA复制的酶学和拓扑学变化 参与DNA复制的酶与物质： 1. 底物dNTP（N: A , G , C , T ） 2. DNA聚合酶（DNA polymerase, DNA-pol)? 3. 模板(template) 4. 解螺旋酶（解链酶）（helicase) 5. 拓扑异构酶（topoisomerase) 6. 单链DNA结合蛋白SSB 7. 引物酶（primase) 8. 引物（primer) 9. DNA连接酶（ligase) 10. 其他因子 二、DNA聚合酶 （DNA polymerase, DNA-pol)? （一）原核生物的DNA聚合酶 DNA-pol I DNA-pol II DNA- pol Ⅲ 1、 DNA- pol Ⅲ： 结构：由10种亚基（22个亚基）组成的不对 称二 聚体。其中αεθ组成核心酶。图 功能：①真正的复制酶，α亚基具聚合活性。 ②ε亚基有3`→5`核酸外切酶活性和碱 基选择功能。图 DNA-pol I作用： 切除引物和突变片段； （5`→3`核酸外切酶活性）图 复制和修复中的空隙填补； （DNA聚合酶活性） 复制中的错误校读。 （3→5`核酸外切酶活性）图 （二）真核生物的DNA聚合酶 DNA聚合酶主要有5种。 DNA-polα：具引物酶活