高磷论文：高磷对乳鼠心肌细胞生物学效应及聚磷菌除磷作用.docVIP

高磷论文：高磷对乳鼠心肌细胞的生物学效应及聚磷菌的除磷作用 【中文摘要】磷是构成生物体并参与新陈代谢不可或缺的常量元素。磷广泛分布于自然界,完全可以满足人体生理所需,一般不存在缺磷现象。但过量的磷可引起人体内钙磷比例失调,导致骨质疏松、高磷血症等。过量的磷饮食还可增加慢性肾病患者患心血管疾病的危险性,也可能增加正常人患心血管疾病的危险。在慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease, CKD)患者中,高血磷引起的心血管钙化是导致CKD患者死亡的主要病因。对于肾功能不全的肾病患者,严格控制饮食中磷的摄取量是关键,这不仅可以延缓肾功能衰竭,还可以预防肾脏病变的发生。从这些方面可以看出高磷对人和动物的健康有着重要的影响。然而不幸的是,由于环境污染和污水排放,江河湖海磷污染的现象日益严重,高磷污染的水源不仅产生了棘手的环境问题,而且严重威胁人类的健康。因而深入了解高磷对一些细胞的生物学效应,探寻能有效处理高磷的微生物,有着重要的意义。本论文通过观察不同浓度的高磷对乳鼠心肌细胞原代培养的影响,探讨了高磷对乳鼠心肌细胞的生物学效应,包括高磷对乳鼠心肌细胞增殖抑制凋亡情况和高磷对乳鼠心肌细胞钙化情况的研究,以了解高磷与乳鼠心肌细胞异位钙化的关系,从而分析高磷对人和动物健康的影响。此外,从环境样品中分离筛选了聚磷菌,并对其去除污水中高磷的效能进行分析,这对降低控制高磷引起的水体污染及饮用水安全有着重要的意义。主要结果如下：1.分别采用酶消化法和组织贴壁法分离乳鼠心肌细胞,并根据所得细胞的活力和纯度,对两种方法进行了比较,从而确定适用的分离乳鼠心肌细胞原代培养的方法。结果表明,两种方法均可得到乳鼠心肌细胞,有节律性搏动,免疫组化染色胞浆呈褐色,细胞核呈蓝色,确定为乳鼠心肌细胞。两种方法得到的心肌细胞活力均在95%以上,无显著差异(P0.05)。但酶消化得到的细胞纯度较高,为97.638%,而组织贴块法为82.295%,酶消化法优于组织贴壁法,二者有显著差异(P0.05),从第4d起,所有高磷组细胞增殖抑制率均高于对照组(P0.05)。钙沉积影响结果表明,与对照组相比,三个高磷组钙沉积量均明显高于对照组(P0.05),且钙沉积含量与作用时间及浓度有密切关系。OPN含量及表达量含量结果显示,与对照组相比,三个高磷组OPN含量及表达量显著升高(P0.05),且随着时间和浓度的增加而明显增加。3.根据caspase-3活性和DNA ladder方法评价了高磷对乳鼠心肌细胞凋亡的作用。高磷组乳鼠心肌细胞2d后凋亡蛋白酶Caspase3含量增加,随着浓度、时间的增加而加增加,Caspase3含量由对照组(1mmol/L磷)的0.034 pmol/L上升至9mmol/L磷的0.344 pmol/L。在细胞培养后期,即培养6d后发现,高磷组6 mmol/L,9 mmol/L培养的乳鼠心肌细胞产生凋亡片段。4.从污水中分离到一株高效聚磷菌J-12,经生理生化以及16S rDNA鉴定为节杆菌属的一个种(Arthrobacter sp.),以初始磷浓度为20 mg/L的合成废水,考查了温度,pH值,接种量,以及微量元素对J-12茵除磷特性的影响。结果表明当培养温度32℃,pH 7,接种量10%,种龄为16h,添加一定微量元素时,培养10h后,合成废水中总磷由20mg/L降至0.1mg/L,污水中磷的去除率达到99.5%。 【英文摘要】Phosphorus is an indispensable element for the metabolism and life of organisms. There is no deficiency of phosphorus in human and animal because phosphorus widely distributed in nature. However, high phosphorus content is harmful to the health of human. The hyperphosphate dietary can cause imbalance of calcium and phosphorus, leading to osteoporosis and hyperphosphatemia. It can also increase the risk of cardiovascular disease in normal person, especially in patients with chronic kidney disease. Hyperphosphatemia is the leading cause of cardiovascular calcificati