植物药对MDR1基因调控及对P糖蛋白功能影响.docVIP

植物药对1基因的调控及对P功能的影响 P糖蛋白（P-gp）是由人类MDR1基因编码的磷酸糖蛋白，是ATP转运蛋白超家族成员之一，具有ATP依赖性的药物外排泵功能。定向诱变研究显示P-gp各处都分布着药物结合位点，甚至是ATP结合区域。P-gp在肝、肾、胰腺、小肠、结肠、肾上腺的上皮细胞及血脑屏障表面高度表达，在药物的吸收、分布、排泄过程中发挥着重要作用。多药耐药(MDR)是指肿瘤细胞接触了一种抗肿瘤药物后，产生了耐受其他多种结构全然不同，作用机制也大相径庭的抗肿瘤药物的耐药性。P-gp与许多抗肿瘤药物的MDR有关，比如：紫杉醇、长春碱类、，这些抗肿瘤药的MDR，预后不良都伴随着P-gp的过度表达目前常用的P-gp抑制剂主要有钙离子通道拮抗剂（维拉帕米）环孢素肽酶抑制剂（利托那韦）等，但这些药物均可引起严重的不良反应，限制了其在临床上的应用。于是从植物药中寻找副作用小的有效的P-gp抑制剂就成为近年的研究热点。下面这篇综述总结了近年来植物药对P-gp调节作用的研究进展。 1 姜黄素 姜黄素是从植物姜黄的根茎提取出来的多酚类化合物，具有广泛的药理活性，其抗肿瘤作用是目前国内外研究的热点。大鼠的肝细胞原代培养了72h后高度表达了P-gp，姜黄素以剂量依赖的方式抑制了P-gp底物罗丹明123的流出，蛋白印迹（Western Blot）分析显示姜黄素降低了P-gp的表达水平[1]。50～150μmol的姜黄素对新鲜的肝细胞有毒副作用，但对培养了24～48h的细胞毒性作用显著降低。高浓度的地塞米松和二甲亚砜（DMSO）（可以抑制P-gp自发的过度表达）可以显著的减少细胞对姜黄素的耐受。光亲和标记实验显示姜黄素可以和azidopine（一种能够特异性标记P-gp的光亲和标记物，为钙拮抗剂二氢吡啶类似物）竞争性的结合P-gp。Anuchapreeda, S. [2]用姜黄素（1、5、10μmol）处理人类宫颈癌KB-V1细胞72h，姜黄素以浓度依赖的方式显著降低了P-gp和MDR1基因的表达：Western Blot结果显示P-gp的表达量分别下降8%、43%和69%，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）结果显示MDR1 mRNA的表达分别降低了17%、22%、40%。用30μmol的姜黄素处理细胞60min，可使罗丹明123在细胞中的蓄积增加2.6倍。另外, 姜黄素抑制了三磷酸腺苷酶(ATPase)的活性，也抑制了P-gp和哌唑嗪类似物的光亲和标记，这个结果显示姜黄素和P-gp有直接的相互作用，可能和哌唑嗪结合与同一位点。Pornngarm Limtrakul[3] 分别考察了姜黄素，去甲氧基姜黄素，二去甲氧基姜黄素对人类宫颈癌KB-V1细胞P-gp和MDR1 mRNA的影响。结果显示：和对照组（DMSO组）相比，5μmol的姜黄素，去甲氧基姜黄素，二去甲氧基姜黄素使得P-gp的表达降低43%，10%，88%，MDR1 mRNA的表达量降低30%，13%，49%。因此，二去甲氧基姜黄素是姜黄素的最有效活性成分。 2 粉防己 植物粉防己的主要活性成分是其根中的粉防己碱，临床上主要用于治疗高血压心律失常心肌缺血等。符立梧等[4]研究发现粉防己碱具有极强的体外逆转MDR的作用，其逆转活性是经典P-gp抑制剂维拉帕米的10倍，能完全逆转人类乳腺癌MCF-7 /ADR和KBV200细胞株的耐药性。同时，以MCF-7 /ADR和KBV200两个细胞株在裸鼠体内的移植瘤模型中的研究表明，粉防己碱亦具有显著的体内逆转活性。熊慧瑜等在体外逆转活性研究中发现粉防己碱浓度＞ 0.125μmol·L-1时，能够完全逆转MCF7 /ADR和KBV200细胞对多柔比星、长春碱和紫杉醇的耐药性，甚至在0. 0625μmol·L-1的浓度下仍可逆转KBV200细胞对长春碱和紫杉醇的耐药性。陈宝安[5]用粉防己碱处理K562/A02细胞12、24、48h，结果发现粉防己碱对细胞膜表面的P-gp下调呈时间依赖性，作用越久，P-gp的下调越明显，48h下调作用最强。研究发现粉防己碱逆转MDR的机理是粉防己碱具有钙拮抗作用和膜调节作用，可以干扰P的药物外排机制及影响其表达。 3 人参 人参是一种广泛应用的植物药，有抗高血压、抗疲劳、保护神经、增强免疫和抗癌等作用。它的主要活性成分是人参皂苷。研究发现人参皂苷Rh2有很强的抗肿瘤活性，人参皂苷Rg3在体内可以代谢成Rh2和原人参二醇，对不同的肿瘤细胞系均有很强的细胞毒性[6]。实验显示20(S)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rg3、Rh2、Rg1等对P-gp均有调节作用。在人类纤维癌KBV20C细胞中，20(S)-人参皂苷Rg3可以抑制P-gp对多柔比星和长春碱的外排，从而逆转细胞的MDR。进一步的研究显示人参皂苷Rg3抑制药物迸出的机制