黄芩苷对动物过敏性哮喘的治疗作用及作用机制专题研究.pdfVIP

中文摘要 黄芩苷对动物过敏性哮喘的治疗作用及作用机制研究 摘 要 目的：本课题研究黄芩苷对于豚鼠以及哮喘模型小鼠的治疗作用，并 对其可能的作用机制进行初步研究。 方法： 1黄芩苷对豚鼠离体气管的影响作用 取离体豚鼠气管，将豚鼠气管剪成宽约3mm，长约20mm的螺旋气管 肌肉张力换能器，传入RM6240B／C生物医学信号采集处理系统，观测不 收缩的影响。 2黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的影响作用： 钟罩内用乙酰胆碱及组胺混合溶液引喘，分别给予黄芩苷和阳性对照药雾 化吸入后，观察豚鼠状态，记录豚鼠引喘潜伏期。 3小鼠哮喘模型实验 3．1小鼠哮喘模型的制备 阳性药组，黄芩苷低中高剂量给药组。采用卵蛋I刍(OVA)致敏，激发，制 作小鼠支气管哮喘模型，观察记录实验动物造模前后精神状态，生理指征。 卵蛋白溶液激发，连续6天，每天一次，每次30分钟；给药组激发前1小时 雾化吸入给予黄芩苷低、中、高剂量中性溶液，空白对照组致敏液，激发 液，治疗药液均用0．9％生理盐水替代，第2l天取材。 3．2检测模型小鼠免疫器官脏器系数 迅速摘取实验模型小鼠脾脏以及胸腺，记录哮喘小鼠模型试验中各组 小鼠脾脏及胸腺脏器系数。 3．3HE染色法观察各组小鼠肺脏组织的形态变化。 迅速摘取实验模型小鼠左侧肺脏，置于中性4％甲醛溶液中固定，石 中文摘要 蜡包埋，切片，苏木精一伊红染色，观察各组哮喘模型小鼠肺脏组织的形 态学变化。 3．4 ELISA(酶联吸附实验)法检测各组小鼠血清中几．4，IFN-y的含量。 取各组哮喘模型小鼠血，静置1小时后离心取上层血清，ELISA试剂 盒检测各组哮喘模型小鼠血清中m-4，IFN-y的含量。 的mRNA的表达水平。 取实验模型小鼠右侧肺脏，提取各组模型小鼠肺脏组织总RNA，应 中m．4，IFN—y的mRNA的表达水平。 结果： l黄芩苷对豚鼠引喘潜伏期的作用 豚鼠引喘潜伏期实验中，黄芩苷能够延长组胺和乙酰胆碱混合喷雾所 具有显著差异(P0．05)，说明黄芩苷能对组胺和乙酰胆碱混合喷雾所引起 的豚鼠药物性哮喘具有保护作用，能够改善乙酰胆碱和组胺引起的支气管 痉挛。 2黄芩苷对离体豚鼠气管的舒张作用 黄芩苷对乙酰胆碱和组胺诱导的气管平滑肌收缩具有明显的拮抗作 用。对于乙酰胆碱诱导的豚鼠支气管平滑肌收缩，加入黄芩苷0．046、0．092、 0．1 豚鼠气管平滑肌的最大张力无影响，显示出黄芩苷对于乙酰胆碱具有比较 显著的非竞争拮抗作用，提示黄芩苷非竞争性拮抗气管平滑肌M受体从而 达到抑制乙酰胆碱引起气管平滑肌收缩的目的。对于组胺诱导的豚鼠支气 管平滑肌收缩，加入黄芩苷0．046、0．092、O．184mmoVL孵育30分钟之后， 可使组胺累积浓度量效曲线右移，对豚鼠气管平滑肌的最大张力无影响， 提示黄芩苷能够非竞争性拮抗气管平滑肌H受体从而达到抑制气管平滑 肌收缩的目的，显示出黄芩苷对于组胺拮抗作用略低于对乙酰胆碱拮抗作 用。 3黄芩苷对于哮喘小鼠免疫器官的作用 黄芩苷能够降低胸腺指数与脾脏指数，中、高剂量组与模型组相比差 中文摘要 异有统计学意义(P0．05)，说明黄芩苷能够逆转模型引起的免疫应答过 程，同时改善炎症对于小鼠机体的影响。 4黄芩苷对于小鼠支气管哮喘的治疗作用 对照组和正常小鼠相比，主要表现为支气管周围炎症以及血管周围炎症。 炎症细胞的类型主要为单核巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞，并可见 少数淋巴细胞以及中性粒细胞。此外伴有间质性肺炎病变。给予哮喘模型 小鼠黄芩苷低、中、高中性溶液雾化吸入治疗之后，能够减轻支气管哮喘 的症状以及肺脏间质炎症的病变程度，其中低剂量组效果略差，中、高剂 量组效果较好。 5黄芩苷对于哮喘小鼠血清中IL．4以及ⅢN—Y的影响 黄芩苷对小鼠血清中Ⅲ．4的影响：结果表明，与正常对照组相比较， 哮喘模型组、黄芩苷低剂量治疗组和布地奈德阳性对照组血清中也一4含量 均明显升高(PO，011。 与哮喘模型组相比：中、高剂量黄芩苷治疗组以及阳性药布地奈德治 疗组血清中m．4有明显降低伙O．01)。 黄芩苷对小鼠血清中ⅢN．Y的影响：结果表明，于