禽腺病毒QU株一个复制非必需区的鉴定.pdfVIP

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2017-09-03 发布于重庆
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禽腺病毒QU株一个复制非必需区的鉴定.pdf

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生物工程学报 Chin J Biotech 2008, July 25; 24(7): 1263-1267 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 研究简报禽腺病毒QU 株一个复制非必需区的鉴定 1 2 1 3 3 3 孙锦 , 李秋艳 , 李云龙 , 黄兵 , 宋敏训 , 李新华 1 山东师范大学生命科学学院动物抗性省级重点实验室, 济南 250014 2 青岛农业大学, 青岛 266109 3 山东省农业科学院家禽研究所, 济南 250023 摘要: 禽腺病毒QU 弱毒株属于鸭腺病毒 1 型病毒, 可作为潜在的重组疫苗载体。为确定QU 株的复制非必需区, 参照鸭腺病毒 1 型病毒基因组右侧E4 区附近序列设计引物, 扩增 QU 株基因组的一段 3.4 kb 片段, 插入来自pEGFP-C1 质粒的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达盒片段, 构建了含EGFP 基因的重组质粒pADGFP 。采用脂质体介导法, 将重组质粒pADGFP 与QU 株共转染CEF 细胞, 用96 孔板稀释法筛选纯化表达绿色荧光蛋白的重组QU 病毒株rQUGFP 。该重组毒的生长曲线与亲本毒一致, 连续传代后病毒滴度稳定。结果表明, QU 株基因组右侧E4 区附近一段包括ORF1 、 ORF8 和ORF9 三个开放阅读框的区域为病毒的复制非必需区, 且插入的EGFP 基因可以稳定表达。为进一步以禽腺病毒QU 株为载体构建重组疫苗的研究打下基础。关键词: 禽腺病毒, 鸭腺病毒 1 型, 复制非必需区, 增强型绿色荧光蛋白, 重组病毒 Identification of a Non-essential Region for Replication of Fowl Adenovirus QU Strain 1 2 1 3 3 3 Jin Sun , Qiuyan Li , Yunlong Li , Bing Huang , Minxun Song , and Xinhua Li 1 Key Laboratory of Animal Resistance, College of Life Science, Shandong Normal University, Ji’nan 250014, China 2 Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109