纤溶酶原激活物抑制因子-1对肝星状细胞活化及细胞外基质合成的影响.pdfVIP

ChineseHepatology，Api．2011，Vo1．16，No．2 · 论 著 · 纤溶酶原激活物抑制因子一1对肝星状细胞活化 及细胞外基质合成的影响 焦黎 武希润 王琦 【摘要】 目的 探讨外源性纤溶酶原激活物抑制 因子一1(PAI一1)对人肝星状细胞 (LX-2)活化及细胞外基质合成 的 影响。方法 采用 四甲基偶氮唑盐法 (MTT)检测培养液 中加入 PAI一1后 LX一2细胞的增殖变化 ，确定 PA¨ 的最佳干 预浓度 。将 LX-2培养液 中加入 PAI-1培养 12h，ELISA法检测细胞上清液 中转化生长因子 (TGF~1I)、透 明质酸 (HA) 的变化 ；免疫细胞化学法检测 LX-2细胞 内a一平滑肌肌动蛋 白(a—SMA)、基质金属蛋 白酶一2(MMP一2)、基质金属蛋 白酶 抑制剂一1(TIMP-1)、尿激酶型纤溶酶原刺激物 (PLAU)及 PAI-1蛋 白变化 ；逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)检测 LX一2 细胞 内TGF71ImRNA和 PAI一1mRNA变化 ，分析其相关关系。结果 PAl-1对 LX-2细胞增殖刺激作用 明显，PAI一1 浓度为10ng／mL时刺激作用最为 明显 (F=11．697，P0．O1)。加入 PAI-112h后(刺激组)较未加入PAl一1(对照组)， 细胞上清液中TGF~1I、HA表达显著增加(=5．474，t=5．785，PO．01)；LX-2细胞 内a—SMA、TIMP一1、PAI一1蛋 白表 达均显著增加(t=5．438、9．511、4．857，P0．01)，而 MMP一2、PLAU蛋白表达差异无统计学意义(￡=0．473、0．58l，P 0．05)；LX-2内TGF71ImRNA、PAI-1mRNA增加显著(t=4．683，t=4．135，P0．[)1)，TGF~1I与 PA1-1mRNA呈显 著正相关(r=0．827，P0．05)。结论 PAI-1可通过活化 LX-2，刺激 LX-2TGF~1I蛋 白及 mRNA的表达 ，促进细胞外 基质生成 ，从而促进肝纤维化、肝硬化 的形成和发展 。 【关键词】 肝纤维化 ；肝星状细胞 ；纤溶酶原激活物抑制 因子-1；转化生长 因子 B1；细胞外基质 TheeffectofPlasminogenactivatorinhibitortype-1onHSCandsynthesisofextrocellarmatrix JIAOLi，WU X — run，WANG Qi． DepartmentofGastroenterology，SecondAffiliated HospitalofShanxiMedicalUniversity， Taiyuan 030001，China [Abstract] Objective Tostudytheeffectofplasminogenactivatorinhibitortype一1(PAI一1)ontheactivationof hepaticstellateceils(LX一2)andextrocellarmatrix．Methods TheeffectofPAI一1onLX一2proliferationwasdetectedby Methylthiazolyltetrazolium (MTT)．Afterincubation with PAI一1for12 h，theleve1ofhyaluronicacid(HA)and transforminggrowthfactor-71l(TGF71I)inLX一2supernatantweredetectedwithELISA，andthelevelofsmoothmuscle d—actin (a—SMA)，matrixmetalloproteinase一2(MMP一2)，tissueinhibitorofmetalloprotei