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2017-09-02 发布于重庆
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三种获取目的基因的PCR方法.pdf

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《乳业科学与技术》 2008年第4期(总第131期) 195 三种获取目的基因的PCR方法李鹏，刘文忠，栗艳 (山西农业大学，山西太谷县030801) 摘要：对反向PCR、反转录PCR和锚定PCR几个常用的PCR方法的概况及其使用，做了简单介绍。关键词：反向PCR；反转录PCR；锚定PCR 中图分类号：Q789 文献标识码：A 文章编号：1671-5187(2008)04-0195--04 TheIntroductionofPCR for Gene TechniqueTarget Li Yan Peng，LiuWenzhong，Li ofShanxi (Shanxi 030801，P．R．China) AgriculturalUniversity，Taigu Abstract：severalPCR for chasinverse PCR technique gene，su PCR，reversePCR，anchored target wereintroduced generally． words：inverse PCR Key PCR；reversePCR；anchored 基因工程流程的第一步就是获得目的DNA 于1985年与Saiki等人正式表了第一篇相关的论片段，如何获得目的DNA片段就成为基因工程的文。此后，PCR的运用一日千里，相关的论文发表关键问题。所需目的基因的来源，不外乎是分离自质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广 PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的泛应用，成为分子生物学研究的最重要技术。方法来筛选【”等。 Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。 PCR是一种在体外快速扩增特定基因或 1PCR的概念 DNA[31序列的方法，故又称为基因的体外扩增法。 PCR技术自问世以来已成为获得外源基因的一 PCR技术是1985年美国公司Cetus公司个有效的手段，只要直到目的基因的核苷酸序列， Mullis等人建立的一套大量扩增特异DNA片段 chain人们就可设计一段引物，利用PCR技术，在试管的系统，即聚合酶链式反应(polymrase I) 中建立反应，经数小时之后，就能将极微量的目的 reaction，PCR)。DNA聚合酶(DNA polymerase 最早于1955年发现，而较具有实验价值及实用基因或特定的DNA片段扩增数十万倍，乃至于百万倍。PCR技术操作简单，容易掌握，结果也较为性的Klenow ofE．Coli则是于70年代 fragment