气虚血瘀证(心肌缺血)大鼠模型单核细胞炎性因子表达的相关性探讨.pdfVIP

中 医 药 学 报 ·l6‘ Ac·taChineseMf-dic·ineand V01．38．No．4．2010 Phamlacology 气虚血瘀证(心肌缺血)大鼠模型单核细胞炎性 因子表达的相关性探讨 陈婵，郭淑贞，王伟4，仇琪，王娟，李春 (北京中医药大学，北京100029) 摘要：目的：探讨气虚血瘀证与单核细胞(PBMC)的相关性及其可能的炎症机制。方法：复制心梗气 虚血瘀证动物模型，采用半定量RT—PCR技术检测模型组及假手术组动物术后第7天、14天、28天外 与单核细胞密切相关，可能成为该证候重要的微观指标。 关键词：气虚血瘀证；动物模型；单核细胞；炎性因子 中图分类号：R241．3 文献标识码：A 近年研究表明，气虚血瘀证与炎性反应关系密切。 2501zL)，Gold 循环血中的单核细胞通过接受抗原刺激、表达并释放 pendorf，美国)，凝胶成像仪(Alpha 多种细胞因子在炎症级联反应中扮演着重要的角色。 胞培养箱(Sanyo，日本)。 因此，本文拟利用气虚血瘀证(心肌缺血)大鼠模型， 1．1．3引物设计及合成 旨在探讨气虚血瘀证与单核细胞的相关性及其可能的 依据GenBank基因数据库，利用Primer5．0软件 炎症机制，以进一步揭示该证侯的内在生物学基础。 设计引物，由三博远志生物公司合成。引物序列及扩 l材料和方法 1．1材料 1．1．1试验动物与动物模型的制备 CAGTC一3 CACA 清洁级雄性SD大鼠50只(购于北京维通利华公 GCAGCATCT一3’；RP：5 司)，体重250±209，随机分为两组，模型组28只，假 手术组22只；模型组动物开胸后行左冠结扎，假手术 CCACAACAGACCAGT一3 组动物开胸后左冠状动脉前降支只穿线不结扎，具体 手术过程参考文献…。 7：RP：5’一GG 1．1．2主要试剂和仪器 (FP：5’一CAACCGTGAA 淋巴细胞分离液(普利来，lOOmL)，1640培养基 RP：5’ 一3’： (普利来，500mL)，Trizol(Invitrogen，lOOmL)，琼脂糖 DNA 692bp)。 (鼎国国际，lOOg)，lOObpMarker(TaKaRa， 1．2方法 收稿日期：2010—03—20修回日期：2010—06—07 1．2．1血样采集 基金项目：“重大新药创制”科技毳大专项(编号：2009ZX09502—018)； 术后第7、14、28d处死两组动物(各时间点模型、 闰家重点基础研究发展计划(973计划)项目(No． 假手术组动物每组至少存活7只)，腹主动脉取血 2003CB517105) 作者简介：陈婵(1983一)，女，博士研究生，研究方向：中医药防治心血5mL，肝素抗凝。 管疾病的临床与基础研究。 1．2．2外周血单核细胞的分离与培养 }通讯作者：王伟，E—mail：wangwei26960@126．com 用一倍PBS等倍稀释抗凝全血，使用毛细吸管将