人CNTF突变体(CNTFM)基因的克隆、表达和产物纯化及活性鉴定.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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人CNTF突变体(CNTFM)基因的克隆、表达和产物纯化及活性鉴定.pdf

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ISSN 中国生物化学与分子生物学报 2005 年 6 月 CN 　113870Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 21 (3) :309～314 人 CNTF 突变体( CNTFM) 基因的克隆、表达和产物纯化及活性鉴定李鸿钧1) , 　马雁冰1) , 　张　鸣1) , 　张林虹2) , 　张光明1) , 　戴长柏1) , 　孙茂盛1) ( 1) 中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所, 昆明　650118 ; 2) 昆明医学院附属第二医院, 昆明　650031) ( ) 摘要　采用 PCR 的方法对睫状神经营养因子 CNTF 基因进行改造 , 获得 CNTF 突变体基因 (CNTFM) ,将 CNTFM 基因克隆入表达载体pBV220 ,在大肠杆菌 BL21 ( Gold) 中进行了表达. 目的蛋白占细胞总蛋白55 %左右 , 以包涵体形式存在,经 Superdex75 凝胶过滤柱一步纯化和复性 ,获得纯度达 90 % 目的蛋白. 纯化的重组 CNTFM 蛋白能促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起 ,能明显减轻实验小鼠的体重 ,表明 CNTFM 具有良好的体内、体外生物学活性 ,为开发新型高效的减肥药奠定了基础. 关键词　CNTFM 基因 ,表达 ,产物纯化 ,生物学活性中图分类号　Q78 ,R338 Cloning , Expression and Purification of Human CNTF Mutant ( CNTFM) and Characterization of Product 1) 1) 1) 2) LI HongJun , MA YanBing , ZHANG Ming , ZHANGLinHong , 1) 1) 1) ZHANG GuangMing , DAI ChangBai , SUN MaoSheng ( 1) Institute of Medical Biology , Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College , Kunming 　650118 , China ;2) Second Affiliated Hospital of Kunming Medical College , Kunming 　650118 , China) Abstract 　Ciliary neurotrophic factor (CNTF) is a trophic protein that promotes survival andor differen