补阳还五汤及有效部位生物碱和苷对大鼠血小板聚集及血小板环核苷酸的影响.pdfVIP

补阳还五汤及有效部位生物碱和苷对大鼠血小板聚 集及血小板环核苷酸的影响1 1 2 3 江劲波 ，杨静 ，邓常青* 1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南长沙（410007 ）； 2. 中国中医科学院西苑医院，北京（100091 ）； 3. 湖南中医药大学病理生理实验室，长沙（410007 ） 摘 要：目的：探讨补阳还五汤及其有效部位生物碱和苷抗血小板聚集及机制。方法：大鼠 分别给予补阳还五汤原方、生物碱、苷和抵克利得，进行ADP 诱导的血小板聚集实验。取 聚集试验前、后的血小板提取cAMP 、cGMP ，采用放免法检测cAMP 、cGMP。结果：各组 血小板聚集比较，生物碱组、苷组和抵克利得组血小板聚集强度与空白组相比显著降低 (P0.01)。原方组血小板聚集强度与空白组相比显著降低(P0.05)。血小板聚集后 cAMP 含 量降低（P ＜0.01) ，而原方、生物碱、苷和抵克利得均可抑制ADP 诱导的血小板 cAMP 下 降（P ＜0.05 ～P ＜0.01 ）。血小板聚集后cGMP 含量降低（P ＜0.01 ），原方、生物碱、苷和抵 克利得也可抑制聚集后血小板cGMP 下降（P ＜0.05 ～P ＜0.01 ）结论：生物碱、苷、原方和 抵克利得可抑制 ADP 诱导的大鼠血小板聚集, 各药可抑制血小板聚集后血小板内 cAMP、 cGMP 的下降，提示其抗血小板聚集作用是通过抑制聚集后血小板内环核苷酸降低而实现 的。 关键词：补阳还五汤 有效部位 血小板聚集 环磷酸腺苷 环磷酸鸟苷 动脉血栓形成是心脑血管缺血性疾病的主要原因之一。在动脉血栓形成过程中，血小板 活化是其主要原因之一，其中血小板聚集是血小板活化过程中不可缺少的环节。血小板内环 磷酸腺苷（cAMP ）、环磷酸尿苷（cGMP ）是细胞内信号传递的第二信使，各种诱导剂作 用于血小板时首先与其特异的受体作用，通过共同途径第二信使，从而促使血小板聚集，引 起血小板活化[1] 。目前研究表明，升高cAMP、cGMP 的药物能抑制诱聚剂诱导的血小板聚集 [2，3] 。 补阳还五汤是治疗缺血性脑血管病的方剂，已有的研究表明，该方具有抗动脉血栓的作 用。在对血小板活化的研究中发现，补阳还五汤对生理状态下大鼠血液中血小板活化因子 (PAF)无明显影响，但对血栓形成大鼠动脉血中 PAF 含量的升高具有明显抑制作用[4] 。大鼠 口服给药后，对电刺激动脉血栓模型和静脉血栓模型均有抑制作用[5，6] 。新近我们研究表明， 该方中抗缺血性脑损伤的主要有效部位为生物碱、多糖、苷、苷元[7]，由于生物碱和苷为其 中主要的水溶性有效部位，因而推测该方中此两类有效部位也可能为其中抗血栓作用的物质 基础之一。因此，本研究从对血小板聚集及血小板 cAMP、cGMP 的影响研究了该方及有效 部位的抗血小板作用及机制。 1 材料 1.1 药物和试剂 补阳还五汤原方由黄芪 60g、赤芍 9g、川芎 6g、当归 9g、地龙 9g、桃仁 9g、红花 9g 1 [基金项目]教育部科学技术研究重点项目（No.204100）;湖南省教育厅重点项目（No.03A033）；国家自 然科学基金项目（No. *通讯作者：邓常青，Tel ：0731 －5381123，E-mail: dchangq@；地址：长沙市韶山中路 113 号 邮 编 410007 。 -1- 组成。上述药物由本院药剂科一次性购齐，按该方组成比例制备补阳还五汤原方提取液， 生药浓度 1g/ml。再由原方提取液采用酸碱沉淀、离子交换树脂层析等方法提取生物碱、苷， 浓度为生物碱 0.18g/ml，苷 0.34g/ml 。两类有效部位分离完全，相互之间无混杂，以高压液 相色谱法测定有效部位中质控物的含量，对两类有效部位进行质量控制，其中生物碱中川芎 嗪含量为 9.76mg/g 生物碱；苷中黄芪甲苷含量为 2.39mg/g 苷，苦杏仁苷含量为 17.9mg/g 苷。 临用前分别配制浓度为原方 750g/L,生物碱 20.9g/L,苷