巴西海参Ludwigothurea grisea的体壁多糖类型、性质及活性研究.pdfVIP

第 36卷第2期 云南中医学院学报 Vo1．36No．2 2013年4月 JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine 4．2013 巴西海参Ludwigothureagrisea的体壁多糖类型、性质及活性研究 罗 兰 ，赵金华 ，向静颖 ，李 姿 ，吴明一 ，王盛民 △ (1．西南交通大学 ，四川成都 610031；2．中国科学院昆明植物研究所 ，云南昆明650201； 3．云南中医学院，云南昆明 650500) 摘要：目的 研究巴西海参Ludwigothureagrisea所含多糖种类、理化性质及其活性。方法 提取分离海参多 糖，研究其理化性质 、波谱特征和抗凝活性。结果 L．grisea体壁中得到3种多糖，化学结构及理化性质存在显著性 差异 ，LG～1为硫酸酯取代的岩藻聚糖；LG一2由0一【葡萄糖组成，为中性葡聚糖；LG一3由岩藻糖 、葡萄糖醛酸和乙 酰氨基半乳糖组成，为岩藻糖化糖胺聚糖。LG一3抗凝活性强于LG一1，LG一2无抗凝活性。结论 此海参中至少含有 3种不同类型的多糖，中性葡聚糖首次在海参中发现。它们的抗凝活性可能与单糖组成及硫酸酯基含量相关。 关键词：海参；多糖；理化性质；抗凝活性 中图分类号：R284．1 文献标志码：A 文章编号：1000—2723(2013)02—0014—06 海参不仅是珍贵的食材，也是名贵的药材。《本 ，J igothureagrisea由巴西里约热内卢联邦大 草纲 目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓 ， 学Mour~oS．G．Pavao教授研究组惠赠。 摄小便，壮阳疗痿 ，其性温补。国内外研究表明，棘 1．2 试剂 皮动物门海参纲动物体壁含有化学结构特殊的酸 岩藻糖标准品(Fuc，Sigma)，乙酰氨基半乳糖标 性多糖 ，如岩藻糖化糖胺聚糖 (fucosylatedgly— 准品(GalNAc，TCI)，葡萄糖醛酸标准品(GlcA，Alfa cosaminoglycan，FGAG)t 、硫酸化岩藻聚糖 fucan Aesar)，葡萄糖标准品(Glc，AlfaAesar)、半乳糖标 sulfate，FS)3『。这些酸性多糖具有广泛而强效的药 准品(Gal，AlfaAesar)；右旋糖酐(中国药品生物制 理学活性。FGAG具有抗凝血、抗肿瘤、抗 HIV活性 品检 定所 )；Heparin (Sigma)；木瓜蛋 白酶 (EC 1『1 ， FS除具有抗肿瘤活性用，还可抑制破骨细胞形 3．4．22．2，北京鼎国生物技术有 限责任公司)； 成l31。本实验室ll对l南海产梅花参所含 FGAG进行了 SephadexG-100(2xl00am，GEHeahhcare)，DEAE— 系统研究，发现解聚的FGAG具 良好的抗凝及抗 SepharoseFastFlow(3x7cm，AmershamBiosciences)， HIV活性，并且发现抗凝活性与硫酸根含量有关， Dowex(r)5OWX850—100氢型阳离子交换柱 (1x13 特别是岩藻糖侧链 2，4一二硫酸取代对抗凝活性影 cm，AlfaAesar)；1一苯基 一3一甲基一5一吡唑 啉酮 响较大。本文对巴西产海参Ludwigothureagrisea进 (PMP，99％，ACROSorganics)；其他试剂均为分析 行提取分离纯化，得到3种海参多糖，并对其理化 纯。 性质及其抗凝活性进行研究，以期为海参多糖结构 1_3 仪器设备 鉴定和构效关系研究提供参考。此外，海参多糖结 Agilent1200型高效液相色谱仪 ；ShodexOH— 构复杂，研究困难 ，本文研究海参多糖的理化性质 pakSB一804IaQ柱(8mmx300ram)；示差折光检测 还可以为海