表达幽门螺杆菌黏附素保守区的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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表达幽门螺杆菌黏附素保守区的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建.pdf

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卷期生物工程学报 ! # ()* + ! ,) +# 年月 $%% ’ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 -.*/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 表达幽门螺杆菌黏附素保守区的减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建 ! ! $ ! 白杨王继德张兆山张亚历 ! （第一军医大学南方医院全军消化病研究所，广州 9!%9!9 ） $ （军事医学科学院生物工程研究所，北京 !%%%’!）摘要为构建表达幽门螺杆菌（）黏附素保守区（）的无抗性减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗，采用缺失腺苷酸环 EF 6G 化酶基因（）、环腺苷酸受体蛋白基因（）以及天冬氨酸半醛脱氢酶基因（）的鼠伤寒沙门菌（） 02+ 0*3 0 +4 H#%’$ ! ! ! 作为宿主，将编码的基因插入 K 的组成型表达载体，通过两次转化引入宿主菌，构建了表达基因 6G 6IJ FL6$#1 6G 平衡致死的减毒鼠伤寒沙门重组菌（），采用桥联法测定（）培养上清液和裂 H#%’$ FL6$#106G :M4N6 H#%’$ FL6$#106G 解上清液中6G 的抗原性，参照 58D)DO 叙述的方法及重组菌生长曲线的测定来确定重组菌株的稳定性，通过小鼠口服测定半致死量来确定重组菌的安全性。成功构建了表达的减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株 P9’GMQ2 6G 5 + （），桥联法测定表明重组菌（）培养上清中的含量高于菌体 /23#6)*#)6 H#%’$ FL6$#106G :M4N6 H#%’$ FL6$#106G 6G 裂解液，重组菌在没有选择压力的情况下培养代，随机挑选的重组菌全部都能生长，且在测 FL6$#106G !%% :M4N6 定抗原时均显阳性。重组菌的生长曲线测定表明，（）和（）的生长状态基本一致； 6G H#%’$ FL6$#1 H#%’$ FL6$#106G 口服重组菌株（） !% 后，存活率仍为。成功构建了表达的无抗性