肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响.pdfVIP

维普资讯 {73 ) t 一 动 物 学 研 究 1995，16 (2)：1l9 125 CN 53—1040／Q ISSN 0254—5853 ZoologicalResearch 肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响 谭竹钧 韩雅莉 《内蒙古太学 呼和浩特 01002[) (内蒙 古农牧学院 呼和浩特 010018) 8 6·l 疋争79l ／ 摘要 肌肽促进绵羊精子运动增强，直线运动精子数目增多；棉酚则强烈抑制精子选动并 使精子的运动方式发生改变j肌肽与棉酚混合处理精子，肌肽可不 同程度抵消棉酚对精子产生 的有害作用。但 当棉酚完垒抑制精子运动后，再加入肌肽则不能使精子恢复运动 电镜观察， 肌肽对绵羊精子超艋结构无任何不 良影响；棉酚别造成精子严重损伤，导致生物膜系统损害、 轴丝崩解、线粒体螺旋鞘紊乱等。本文通过肌肽，棉酚加入的时序不同，探讨两者对绵羊精子 运动的影响，井应用电镜观察两者对绵羊精子超艋结构的影响 f ． 关鞠 ， 墼 墼 塑 塑 蹉 ．， j ‘ ／ 肌肽对绵羊精子活力具有显著增进作用，这种效应与绵羊精子能量代谢活动密切相关 (方天祺等，1987)。许多研究表 明，肌肽是一种与细胞能量代谢有关的活性物质，它不仅 促进肌 肉细胞内无氧酵解作用加强 (Qureshi，l962)，而且对细胞 内线粒体氧化磷酸化产 能过程也有很强的增进作用(CeBepHH，1954)。氧化磷酸化供能首先要保证线粒体结构 的完整性，线粒体结构遭到破坏，产能过程必然会受到遏止(Geofferey，1984)。而精子运 动要有足够的能量和保证轴丝系统的完整性。棉酚抗生育效应已被证 明：其主要的靶部位 是精子的线粒体(薛社普，1982)。在人和动物中，无论是 内服还是体外实验都表 明；一定 剂量的棉酚可导致精子线粒体螺旋瞎福素瓿、确 量泡佗 甚至整个线粒体溶胀崩解(顾 芝萍等，1983)，同时棉酚对精子的轴丝系统也有严重的损伤作用(oko，1982)。我们 曾用 低浓度棉酚作为一种线粒体呼吸氧化磷酸化解耦联剂(Abou—Donia等，1974)探讨肌肽作 用时发现，肌肽能抵消棉酚对绵羊精子产生的有害作用。 1 材料与方法 1．1 试剂 肌肽 Sigma产品，棉酚 由中国医学科学院药物研究所提供，其他试剂均为分析纯。 lI2 精液采集及处理 用人工采精常规方法采集 2—3只种公羊(高加索细毛羊，畜龄 2—4岁，健康)精液， 混 匀，按 l：5体 积加 入 18(3精 子洗 涤 液 (40mM KCI，l02mM NaCI， 10mM ·内肇古 自治匠 自然科学基金瓷助项 目 奉文 1994年 4月 l8日收到， 同年 9月 5日任回 维普资讯 J20 动 物 学 岍 笼 J6卷 KH，PO4，5mM MgSO4·7H2O，20mM Tris，05mg／ml链霉素，500 i1／ml青霉 素 pH 74)洗涤 2次，800r／min离心 5min，弃去上清液，用原精液 4倍体积、18~c 培 养 液 洗 涤 1次 (40 mM KCI， 82 mM NaCI， 10 mM MgSO4-7H2O， 10 mM KH PO ，20mM Tris，0．4％ BSA，0．4％果糖 ，10mMa一酮戊二酸 ，0．5mg／ml链霉 素 ，500u／ml青霉素 pH