负载Her-2多肽的DCIK细胞对乳腺癌细胞杀伤作用研究.pdfVIP

维普资讯 第 40卷 第 4期 分 子 细 胞 生 物 学 报 Vo1．40．No．4 2007年 8月 JournalofMolecularCellBiology August2007 负载Her一2多肽的DCIK细胞对乳腺癌细胞杀伤作用研究 应学翔 邹 强 ” 徐永华z． 王恩忠 王红鹰 胡轶红 倪泉兴 l复旦大学附属华山医院外科 ，上海 200040； z中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031) 摘要 本文观察利用树突状细胞 (DC)呈递肿瘤抗原(Her一2多肽)的特性提高DCIK细胞对乳腺癌 细胞的杀伤活性 提取外周血来源的有核细胞诱导分离出细胞 因子诱导的杀伤细胞 (CIK)和树突 状细胞 (DC)。DC负载Her一2多肽后和CIK细胞共培养产生DCIK细胞，并鉴定其HLA基因型。分 析三株肿瘤细胞(MDA—MB一231、SK—BR一3、MCF一7)HLA基因型和Her一2蛋 白表达情况。用细胞毒 试验fCCK一8法 测定DCIK细胞的对三株 Her2表达不同的乳腺癌细胞株的杀伤活性。结果表明 DCIK细胞对 MDA—MB一231、SK—BR一3、MCF一7的杀伤率 (效靶 比 10：1)分别为 5O，38％±3．25％、 52，19％±3，25％、47．O9％±2．41％。而 负载 Her一2多肽 的DCIK细胞对 MDA—MB一231、SK—BR一3、 MCF_1_7的杀伤率分别为76．30％_+1，74％(P0．001)、55．7O％±3，05％(t~0．0143)、47．67％±240％(=()．6972)。 实验证 明负载Her一2多肽的DCIK细胞能显著提高对 Her一2(+)的乳腺癌细胞 的杀伤作用。为乳腺 癌患者进行过继免疫治疗提供 了理论依据。 关键词：DC CIK DCIIK Her-2多肽 乳腺癌 目前是女性最多见的恶性肿瘤。目前乳 原特异性 。即提示该体系诱导产生了细胞毒 T淋 腺癌 的治疗方式主要有手术、化疗 、放疗、内分泌 巴细胞(CytotoxicTLymphocyte，CTL)。本研究采用 治疗和生物靶向治疗等，而其 中的生物靶向治疗 细胞毒实验检测负载 了Her一2多肽的 DCIK对不 以其高特异性和低毒性越来越受到临床 的重视。 同乳腺癌细胞株的杀伤率 。同时通过检测效应细 树突状细胞 (Dendriticcell，DC)是一大类重要 胞 (DCIK细胞)和靶细胞 (乳腺癌细胞)的HLA基 的抗原提呈细胞 (APC)，参与T细胞介导的免疫应 因型和Her一2蛋 白的表达 ，来分析DCIK和DCIK— 答 [。细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine—induced P细胞的特异性杀伤作用 。 killer。CIK)是以T细胞为主要成分的异质细胞群， 1 材料与方法 其主要效应细胞为NKT细胞 (CD3CD56细胞) 。 NKT细胞兼有强大的抗瘤活性与 NK细胞和 T细 1．1 细胞系 胞的表型特征 ，其细胞毒性大于NK细胞 ，其体外 乳腺癌细胞 MDA—MB一231、SK—BR一3购 自上 增殖活性更明显高于 NK细胞 ，因而越来越被肿 海生物化学和细胞生物学所细胞库，乳腺癌细胞 瘤临床所关注[。DC与CIK细胞共培养产物称为 MCF一7为本实验室所有 ；DC、CIK细胞 由本实验室 DCIK细胞，即DC调节的细胞因子诱导的杀伤细 制备 ，血液购 自上海市血液中心 。 胞 (DC—modulatedand Cytokine—inducedKiller 1．2 主要试剂 Cens，简称 DCIK细胞) ．5]，其细胞毒活性和增殖 基 因重组 白介素 4(rhlL