一株多环芳烃降解菌的鉴定及GST基因克隆和序列分析.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’() *! 1( *# 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ +,-,./,0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 一株多环芳烃降解菌的鉴定及!# 基因克隆和序列分析 夏 颖 闵 航 （浙江大学生命科学学院 杭州 %%$8 ） 摘 要：由石油污染土壤中分离到一株能以多环芳烃（菲、芴、萘）为唯一碳源的细菌，经形态 观察、生理生化（ ）和 分析，鉴定该菌为少动鞘氨醇单胞菌（ I=()(@6J1 J K L .() M !#$%’(’%)* )+,$(’-$.$* ）。与#N 0+13 序列同源性的比较进一步确证了鉴定结果。经菲诱导后的细菌谷 胱甘肽 转移酶（ ， ）酶活明显高于未诱导前，表明谷胱甘肽 转移 N6 J)DO:O?=(, N6O0:HP,0:H, JN5 N6 酶可能与多环芳烃的降解有关。根据该酶基因的同源性序列设计引物， 扩增出编码谷胱 QLR 甘肽N6转移酶基因片段，进一步证实在该菌中有JN5 的存在。测序后基于编码JN5 的基因所 进行的系统发育分析表明，该多环芳烃降解菌与其它多环芳烃降解菌在进化上亲缘关系较近。 关键词：鞘氨醇单胞菌，谷胱甘肽N6转移酶，系统发育 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） S4$ 3 %%%6#$%8 $%% %#6%#86%4 多环芳烃（ ， ）是一类广泛分布的化学污染物，因其潜在 Q()G6:0(.:O=- ?GE0(-:0/(H Q3TH ［］ 的毒性、致癌性及致畸致变作用引起了人们的极大关注 。目前对多环芳烃的处理中，微 ［］ 生物降解被视为一种行之有效且不会造成二次污染的方法$ ，因而对可降解多环芳烃污 染微生物的研究也越来越多。近年来，对可降解芳香族化合物细菌中的谷胱甘肽 转移 N6 酶（ ， ）的研究逐渐成为热点。 可以催化谷胱甘肽与异生 J)DO:O?=(, N6O0:HP,0:H,H JN5H JN5 物质的结合从而达到解毒的目的，并且许多编码 JN5 的基因位于降解操纵子上，又使它 ［］ ［］ ! 成为十分有用的报告基因 。U)(GE6V(,H 等 认为编码JN5 的基因可能广泛存在于Q3T 降解菌中并且可以成为检测这类菌的分子工具。 ［］ 目前国内对细菌 7