宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体的生物学特性及对临床菌株的嗜性覆盖研究.pdfVIP

医学临床研究 2014年7月 第 31卷 第 7期 JClinRes，JuI．2014，Vol31，№7 · 论著 · 宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体 的生物学特性及对临床菌株 的嗜 性覆盖研究 王 文杰 (黑龙江中医药大学附属第二医院，黑龙江 哈尔滨 150001) [摘要]【目的】研究宽嗜性铜绿假单胞茵(PA)的生物学特性，为临床控制PA感染提供思路。 【方法】对 5家 医院下水道 中分离出的PA噬茵体 ，采用双层琼脂噬茵斑形成法纯化后 筛选 出宽嗜性噬菌体 ，观察宽嗜性噬菌体 的特征，绘制一步生长线，提取核酸行酶切分析 。【结果】共分离出8株 PA噬菌体 ，筛选 出3株宽嗜性噬茵体 ，其 中PAp一3表现出较宽的噬菌谱。电镜下PAp一3呈透明、圆形、边界清晰的茵斑；PAp一3基因组为 23kb，当感染复 数 (MOI)为0．001时，其感染宿主产生子代 PA 噬菌体滴度最高，为6．4×10 PFU／mL，感染宿主茵的潜伏期 3O min，爆发时间55min，裂解量 100。3株宽嗜性噬菌体交叉组合对I】盘床分离出的2O株 PA吞噬覆盖率为95．O。 (19／20)。【结论】宽嗜性噬茵体具有较广的噬茵谱 ，潜伏期较短，裂解量大，交叉组合吞噬覆盖率高，可为噬菌体 作为抗茵生物制剂提供依据 。 [关键词] 假单胞菌，铜绿 ； 假单胞茵属噬菌体／生理学； 抗药性，微生物 StudyonBiologicalCharacteristicsandCoverageonClinicalStrainsofW ideTropism Pseudomonas AeruginosaPhages WANG Wen—jie(SecondAffiliatedHospitalofHeilongjiangUniversityof TCM 。Harbin 150001．China) [Abstract]【0bjective】Toexplorebiologicalcharacteristicsofwidetropismpseudomonasaeruginosa(PA)in ordertoprovidetheideasforPA infectioncontro1．[Methods]PA phageswereseparatedfrom seweroffivehospi— tals．AfterPA phageswerepurifiedbydouble-agarnegativecolonyformationmethod，widetropism phageswere screened．Thecharacteristicswereobservedandone—stepgrowthlinewasdrawn．Nucleicacidwasextractedfor enzymedigestionanalysis．[Results]Totally8strainsofPA phageswereisolated．Threestrainsofwidetropism phageswerescreened，inwhichPAp一3showedwiderphagespectrum．PAp一3wastransparent，roundand clear boundaryplaque．PAp一3genomewas23kb．WhenMO1was0．001，thetiterofprogenyPA phageproducedbythe infectedhostwashighest(6．4×10 PFU／mL)．Theincubationperiodoftheinfectedhostbacteriawas30min，and theoutbreaktimewas55min，andtheburstsizewas100．Theengulfed coveragerateofcrosscombinationof3 widetropism phageson2OstrainsoftheisolatedPA phageswas95．00 (19／20)．[Conclusion]Widetropism phagehaswiderspectrum ，shorterincubationperiodlargeburstsize，higherengulfedcoveragerateofcrosscombi— nation，andcanprovidethebasisforthep