第41课时 基因工程的基本工具和基本操作程序.ppt

知识综合应用 重点提示 通过“抗虫作物培育过程的有关基因工程知识”的考查,提升“综合运用所学知识解决自然界和社会生活中有关生物学问题”的能力。 典例分析 (2009·江苏卷,34)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀 虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植 物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因), 据图回答下列问题。 (1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后, 反应管中有 种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶 连接的过程,此过程可获得 种重组质粒; 如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切,目的基因与质粒连 接后可获得 种重组质粒。 (3)目的基因插入质粒后,不能影响质粒的 。 (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白,可以协助 带有目的基因的T-DNA导入植物细胞,并防止植物 细胞中 对T-DNA的降解。 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠 上皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞 裂解,昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对 较小,原因是人类肠上皮细胞 。 (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混 合播种,其目的是降低害虫种群中的 基 因频率的增长速率。 解析 本题重点考查转基因技术的相关知识,需特 别注意基因工程的步骤、DNA的复制、基因工程的 操作工具等知识。本题需特别注意图示过程,从中 获取有效信息,然后结合课本知识即可正确解答。 答案 (1)4 (2)2 1 (3)复制 (4)DNA水解酶 (5)表面无相应的特异性受体 (6)抗性 1.(2009·福建理综,32)转基因抗病香蕉的培育过程 如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ 等四种限制酶切割位点。请回答: 定时检测 (1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶 ,对 进行切割。 (2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞 的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香 蕉细胞,应使基因表达载体A中含有 , 作为标记基因。 (3)香蕉组织细胞具有 ,因此, 可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组 织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培 养过程中香蕉组织细胞的 。 解析 本题考查基因工程的有关知识。(1)从图可 看出,只有PstⅠ、EcoRⅠ两种酶能保持抗病基因结 构的完整性,所以构建含抗病基因的表达载体A时, 应选用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ两种酶,对抗病基因的 DNA和质粒进行切割。 (2)卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲 利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应 使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因,以此作 为标记基因。 (3)香蕉组织细胞具有全能性,因此,可以利用组织 培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成 植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉 组织细胞的脱分化和再分化。 答案 (1)PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA、 质粒 (2)抗卡那霉素基因 (3)全能性 脱分化、再分化 2.(2008·江苏卷,32)将动物致病菌的抗原基因导入 马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物 获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的 图和表。 表1 引物对序列表 S1 GTCCGACTAGTGGCTGTG S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG 引物对 B P1 AACTGAAATGTAGCTATC P2 TTAAGTCCATTACTCTAG 引物对 A 请根据以上图表回答下列问题: (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使 用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶, 其最主要的特点是 。 (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱 基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对 引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判 断哪一对引物可采用较高的退火温度？ 。 CCC↓GGGGGG↑CCC CTGCA↓