Lewis+y抗原促进卵巢癌细胞RMG-I血管内皮生长因子受体表达.pdfVIP

·中文论著摘要· Lewis Y抗原促进卵巢癌细胞RMG．I血管内皮生长因 子受体的表达 刖 声 卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤，它的发生机制一直是妇科肿瘤基础与 临床研究探索的重点。卵巢癌的发生与发展是一个极其复杂的多因素的过程，目 前对其发生机理尚不清楚。 细胞膜的脂双层外，几乎全部被一些糖蛋白或糖脂上的糖链所覆盖，形成一 层糖衣。糖蛋白通过不同方式镶嵌在或连接于细胞膜上，外露的糖链部分对细胞． 细胞、细胞．分子的识别十分重要，参与配体结合、信号转导、分子粘附等分子间 的相互作用，与细胞生长、凋亡、分化等重要生命过程密切相关，被称为细胞间 的信使。目前对于糖链的研究已不单满足于整条糖链的功能，已深入到各个糖基 的功能，这方面已有一些报道，却远未阐明，已成为糖生物学和细胞生物学的共 同热点。 Lewis Y抗原是存在于细胞表面糖脂和糖蛋白糖链上的双岩藻糖寡糖， 1，2．岩藻糖转移酶( 1,2．FT)是LewisY抗原合成的终 12-fucosyltransferase， 1，2．FT基因转入人卵巢癌细胞株RMG．I内，建立了Lewis 末关键酶。我们将 Y 高表达细胞株RMG．I．H，发现基因转染后的卵巢癌细胞恶性生物学行为加强，对 化疗药5．氟尿嘧啶(5．fluorouracil)、卡铂等耐药性也增加pⅢ】。 我们在前期研究中发现Lewis Y高表达细胞株RMG．I．H中血管内皮生长因子 EndothelialGrowth (Vascular Y 抗原在卵巢癌发生、发展中的作用机制，我们在前期工作的基础上，通过比较转 染 1，2．FT前后RMG．I细胞表面VEGF受体的变化，进一步探讨Lewis Y在卵巢 癌恶性进展中的作用，为卵巢癌发生、发展机制的研究提供新的途径。 材料和方法 一、细胞株及裸鼠移植瘤模型建立 细胞株RMG．I细胞源于人卵巢透明细胞癌组织，细胞株RMG．I．H为1，2．FT 及Lewis Y抗原高表达细胞系【13】。 选取10只4-6周龄健康雌性裸鼠，体重(20．4 4-O．6)g，随机分成两组，实 验组与对照组裸鼠背部皮下分别注射RMG．I．H及RMG．I细胞悬液O．3血，在SPF 条件下饲养裸鼠，五周后处死，取出皮下瘤块，制备成石蜡块。上述裸鼠皮下移 植瘤经病理检查证实为低分化卵巢透明细胞癌。 二、免疫细胞化学方法 两组细胞铺片，4％多聚甲醛固定，染色方法按SP试剂盒说明书进行。一抗兔 EndothelialGrowthFactor 抗人血管内皮生长因子受体1(Vascular Receptor1， VEGFRl／Fms—like tyrosinekinase，Fit．1)和兔抗人血管内皮生长因子受体2 Factor vEGFI也／ljJlaseinsert EndothelialGrowth (Vascular Receptor2， 有棕黄色颗粒着色为阳性判定标准。拍照并以图像分析软件Meta Morph计算各组 累积光密度值。 三、免疫组织化学方法 卵巢癌