Cd[2+]对离体的鲤鱼脑垂体分泌促性腺激素的影响.pdfVIP

维普资讯 五 f ) 动 物 学 研 究 1995，16 (3)：255--261 CN 53～1040，／Q iSSN 0254-5853 ZoologicalResearch Cd+对离体 的鲤鱼脑 垂体分泌促性腺激素的影响 马广智 林浩然 ．胀为民 (华南 磊 广州5㈨3I】面 系广 5l0275) ，、 ． ． 一l 摘要 采用离体的鲤鱼脑垂体灌流孵育系统，研究重金属镉离子(cd+)对脑垂体分泌促性 腺激素(GtH)的毒害影响。发现 Cdw既能直接刺激 GtH分泌，又抑制鲑鱼促性腺激素类似物 释放激素 (sGnRH A)刺激脑垂体分泌 GtH 作用。实验结果提示，Cd2+对鲤鱼脑垂体 GtH 分 泌细胞的毒害机制之一可能是它干扰 了Ca2+的正 常生理作用。 塑 坚 姗 统 、 ，鲤 - 一 1 ，一随着 代工业的发展，水环境中重金属污染 日益严重，鱼类受到危害首 当其冲。镉 (cd )是危害最为严重的重金属之一，已经发现其对鱼类的下丘脑一脑垂体一性腺轴生殖内 分 泌 调控 系 统 中的性 腺 有毒 害作 用 (Sangalang，1973；Thomas， 1989；Annabelle， 1992)。但是，Cd 对脑垂体和下丘脑的影响尚未见报道 。本实验用离体的鲤鱼脑垂体灌 流孵育系统，研究 cd 对脑垂体分泌GtH 的影响。 1 材料与方法 1．1 实验动物 选用赡 自广州市农贸市场的鲤鱼(CyprinuscarpioL．)体重 25o__500g。雄性，性腺 成熟系数为 9．4±2．1％，实验前鲤鱼暂养在室外水泥池里。 1．2 离体的鲤鱼脑垂体灌流孵育系统 参照林信伟等 已经建立起来的鲤鱼脑垂体灌流孵育系统(林信伟等，1993)。简而言 之，每次实验取两条活鲤鱼断头放血，取出脑垂体切成碎片混匀，将每份相当于半个脑垂 体的碎片分别转移到柱状灌流孵育室 (灌流桂)中。脑垂体碎片先用 199培养液 (含 25mmol／LHEPES和 l5u ／ml制霉菌素)预灌流过液(8一 lOh，流速 5ml／h)实验前 2h将 199培养液换成 HBSS平衡盐溶液 (含 25mmol／LHEPES和 0．1％牛血清 白蛋 白，简称 HBSS，灌流速度为 l5ml／h)oHBSS含 CaZ+1．25mmol／L，缺钙 HBSS不 含 Ca2+。孵育灌流温度为 19±1℃，每 l0min或 5min自动收集器收集一管灌流液样 品，样品贮于一28℃中待测 GtH含量。 本文 1994年 6月 24日收到，同年 9月 2日修回 维普资讯 256 动 物 学 研 究 】6卷 1．3 化 学试 剂 199培养渡(Sigma公司)，TFP(三氟啦嗉Trinu0perazine，Sigma公司)，EDTA(乙二 胺 四乙酸二钠，c10H14N2O8Na2·2H2O)和 CdCI2均为 A．R．级。sGnRH—A(鲑鱼促性腺 激素释放激素类似物)为美国 Salk研究所 J．E．River和W Vale博士惠赠。 1．4 实验设计 ． 实验 l 不 同浓度的 Cd2~对脑垂体分泌 GtH 的影响 实验前 2h用 HBSS代替 199 培养液。不同浓度的 Cd2~用缺 Ca 的