复方中药对环磷酸胺致免疫低下肉鸡的免疫影响.pdfVIP

，-— — 302．．—— 江苏农业科学 2009年第6期 复方中药对环磷酸胺致免疫低下肉鸡的免疫影响 石玉祥 ，赵洪明 ，谷 红 ，肖亚彬 ，王雪敏 ，李 存 (1．河北工程大学，河北邯郸 056038；2．河北省石家庄市畜牧局，河北石家庄 051000) 摘要：研究复方中药对环磷酸胺致免疫低下肉鸡免疫影响。用环磷酸胺处理肉鸡后，观察复方中药对其免疫器 官指数 (法氏囊、胸腺和脾脏)、脾脏淋巴细胞转化率、ND抗体水平影响。试验结果显示复方中药能够提高肉鸡免疫 器官指数、脾脏淋巴细胞转化率 、ND抗体水平 (P0．05)。表明本复方中药能够排除环磷酸胺和法氏囊病毒对鸡所 引起的免疫抑制，提高其免疫机能。 关键词 ：复方 中药 ；环磷酸胺 ；肉鸡 ；免疫抑制 中图分类号：$853．74 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2009)06—0302—02 商业鸡群中IBD等种免疫抑制性疾病均有不同程度的发 抽取 5只雏鸡，无菌取其法氏囊 、胸腺和脾脏，经生理盐水冲 生和流行，二重及多重混合感染的情况很普遍。IBD与CIA都 洗后，用无菌滤纸吸干表面水分后称重，并计算法 氏囊／体重、 是对雏鸡危害严重的免疫抑制性疾病 ，雏鸡感染 IBDV和CI— 胸腺 ／体重和脾脏／体重。 AV后，引起机体体液免疫和细胞免疫系统损伤，增加了其他病 1．4．2 脾脏淋巴细胞转化率的测定 将上述称量完毕的脾 原体的感染和致病机会，并造成更严重的后果 。‘。笔者在前 脏除去外膜，用平衡盐水冲洗数次，加平衡盐水，剪刀剪碎， 期研究中，筛选出复方中药，并证明该复方中药能显著增强肉 200目铜网过滤，分离单个脾细胞。分离的脾脏淋巴细胞样 鸡巨噬细胞吞噬功能、提高新城疫油乳苗的保护率及热应激下 品用含 10％小牛血清的DMEM培养基重悬，调整细胞数为 外周血淋巴细胞转化率和免疫器官指数 “。本试验 以肉鸡 1×10。个／ml；取脾细胞悬液 50 l，加入 10 l标记抗体，混 为研究对象，研究了复方中药对法氏囊病毒和环磷酸胺 (CY) 匀，4℃孵育40min；加入 PBS，5rain洗涤细胞(80OOr／rain) 致免疫低下肉鸡的影响，旨在验证本复方中药的免疫增强作用 3次；细胞沉淀中加入200Ixl1％多聚甲醛4℃过夜。应用流 和机理，为开发复方中药免疫增强剂提供理论依据。 式细胞仪检测各组脾细胞中CD4 、CD8构成比情况。 1．4．3 ND抗体水平的测定 在上述测定免疫器官指数的 1 材料与方法 试验过程中，在屠宰鸡之前对每只鸡进行心脏采血5ml，待析 1．1 中药制剂的制备 出血清后，利用微量血凝抑制法测定其ND抗体水平。 本课题组筛选黄芪、红花、女贞子等市售中药组方，超微 1．4．4 气管和肠道 IgA抗体的检测 在上述测定免疫器官 粉碎，阴凉干燥处存放，待用。 指数的试验过程中，屠宰鸡时收集鸡气管液、肠液，然后利用 1．2 试验动物及处理 间接 ELISA法检测其 IgA抗体水平。 从石家庄市某鸡场购 1日龄雏鸡 8O羽，雌雄各半。在7 2 结果与分析 日龄进行2羽份新支 120冻干苗点眼；分别在 10日龄、17日 龄进行2羽份传染性法氏囊疫苗滴嘴。按常规方法喂养和管 2．1 对免疫器官指数影响 理。随机将80羽 1日龄肉鸡分成 I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共 4组，每组 Ⅱ组肉鸡经环磷酸胺处理后，其免疫器官指数显著低于 2O羽。I组作为正常对照组；Ⅱ组作为免疫抑制对照组，只 I组 (正常对照组)，二者差异显著 (P0．05)；复方中药能显 进行肌肉注射环磷酸胺 80mg／kg(CY80mg／kg) ；Ⅲ组肉 著提