基于均匀设计优化延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后卵裂体系.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2009，37(34)：16857—16858，16871 责任编辑 陈秀晨 责任校对 傅真治 基于均匀设计优化延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后卵裂体系 苗婷婷 ，魏世宝 (1．通化师范学院生物系，吉林通化l34002；2．通化县动物卫生监督所， 吉林通化 134lo0) 摘要 [目的]应用均匀设计对延边黄牛卵母细胞体外成熟及核移植后的卵裂体系进行优化。[方法]用抽吸法回收卵母细胞，在不同 条件下进行卵母细胞的体外成熟培养，然后对成熟卵母细胞进行核移植、融合、激活以及胚胎的体外培养。比较 了在不同的卵巢保存温 度、成熟培养时间以及卵泡直径大小对牛卵母细胞体外成熟率及卵裂率的影响。[结果]延边黄牛卵母细胞体外成熟的最佳条件为在卵 巢保存温度为26或31℃的条件下，选取直径为8．0mm的卵母细胞成熟培养24h；卵母细胞核移植后卵裂的最佳条件为在卵巢保存温 度为26oC的条件下，选取直径为6．0或8．0mm的卵母细胞培养24h。[结论]该结果对延边黄牛或其他种黄牛的育种及种群扩繁具有 一 定的参考意义。 关键词 均匀设计；延边黄牛；卵母细胞；成熟；卵裂 中图分类号 $823．8 1 文献标识码 A 文章编号 o5l7—6611(2009)34—16857—02 OptimizingYanbianCow OocytesMature／n vitroandCleavageSystem afterNuclearTransferBasedonUniform Design MIAOTing-ringetal (DepartmentofBiology，TonghuaNormalUniversity，Tonghua，Jilin134002) Abstract [ObjectivelTheaimwastooptimizeYanbianCOWoocytesmatureinvitroandcleavagesystemafternucleartransferbasedonuni— formdesign．[Method]Oocyteswererecoveredbyaspirationmethod，andoocyteswerematuredinvitro(IVM)withdifferentconditions，then carriedoutnucleustransfer，fusion，activationandnvitrocuhure(IVC)ofembryo．Effectsofovarystoragetemperature．maturationtimeand folliculardiametersizeoninvitromaturationandcleavageratesofCOWoocyteswerecompared． 『Result1Thebestc0nditions0fIVMofYanbi— anCOWoocyteswasthat：theoocytesof8mmdiameterwerematuredinvitrofor24hours whentheovarieswerestoredat26or3l℃．Th ebest cleaveconditionsafternucleustransferofoocyteswasthat：theoocytesof6or8mmdiameterwerecultured nvitroofr24houISwhentheova— tieswerestoredat26℃．[Conclusion]TheresulthassomereferencetoYanbianCOWandotherCOWbreedingandpopulationexpandingprop— agation． Keywords Unifofin design；YanbianCOW；Oocytes；Mature；Cleavage 我国哺乳动物的克隆研究已经取得了较大成就、积累了 水。除生理盐水外，所有药品均用孔径为25Ixm的微孔过滤 丰富经验，尤其是牛羊的克隆意义重大。延边黄牛是中国著 器过滤。 名的五大地方良种牛之一，是我国宝贵的黄牛资源，具有较 1．3 试验步骤 卵巢运回实验室后先用 38．5℃加有双抗 高的经济开发价值 ，被 国家农业部列为重点保护和开发品 的无菌生理盐水洗涤3次 ，然后用带有 16号针头的一次性5 种。延边黄牛体躯粗