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课题3 酵母细胞的固定化 课程标准 尝试制备和应用固定化酶。 课标解读 1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2.尝试制备固定化酵母细胞。 3.尝试利用固定化细胞进行酒精发酵。 1.固定化酶和固定化细胞技术是利用 和 方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括 、 和 。 2.固定化细胞多采用 固定化,而固定化酶多采用 和 。与固定化酶技术相比,固定化细胞技术制备的成本 ,操作 。 3.用包埋法固定化细胞是将微生物细胞均匀地包埋于 中,常用的包埋载体有 、 、 、 和 等。 4.固定化酶的应用实例——高果糖浆的生产 固定化酶技术已经应用于高果糖浆的生产中,生产高果糖浆所需要的酶是 ,所使用的反应柱上的孔应满足 不能通过筛板上的小孔,而 却可以自由出入。 [思维激活1] 日常生活中人们用来蒸馒头的发酵粉在浸泡宜用凉水、温水还是开水? 提示 浸泡发酵粉最好用温水——温度过低,不利于发挥酶活性;温度过高会杀死酵母细胞。 1.固定化酶的应用实例 (1)固定化酶的反应柱示意图:将酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。 (2)利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例: 高果糖浆的生产需要使用葡萄糖异构酶,它能将葡萄糖转化成果糖。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。 2.直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较(见下表) 特别提醒 固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可以反复使用。 【巩固1】 固定化酶和固定化细胞的主要区别是 ( )。 A.前者只能固定胞外酶,后者只能固定胞内酶 B.前者只能固定胞内酶,后者只能固定胞外酶 C.前者可以固定胞内酶和胞外酶,后者只可以固定胞内酶 D.前者只可以固定胞外酶,后者可以固定胞外酶和胞内酶 解析 微生物产生的酶的种类很多,有的存在于细胞内,有的分泌到细胞外。因此,固定化酶可以固定胞内酶和胞外酶,固定化细胞只能固定胞内酶。 答案 C 1.制备固定化酵母细胞的操作步骤:酵母细胞的 →配制物质的量浓度为0.05 mol/L的 溶液→配制 溶液→ 溶液与 混合→ 酵母细胞。 2.在配制海藻酸钠溶液时,加热时要用 ,或者 ,反复几次,直到海藻酸钠完全 为止。如果加热太快,海藻酸钠会 。 3.固定化酵母细胞需要的材料是 、 、 。 4.用固定化酵母细胞发酵:将凝胶珠加入用于发酵的 溶液后,发现有 产生,同时有 散发。 [思维激活2] 用于固定酵母细胞的载体是什么?载体的浓度越高固定效果越好吗? 提示 用于固定酵母细胞的载体是海藻酸钠,海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量——浓度过低形成的凝胶珠内包埋的细胞过少,浓度过高则不易形成凝胶珠。 1.固定化酵母细胞的制备 酵母细胞的活化:1 g干酵母+10 mL蒸馏水→50 mL烧杯中,搅拌均匀,放置1 h ↓ 配制0.05 mol/L的CaCl2溶液:无水CaCl20.83 g+150 mL蒸馏水→200 mL烧杯 ↓ 配制海藻酸钠溶液:0.7 g海藻酸钠+10 mL水放入50 mL小烧杯→小火加热,完全溶化加蒸馏水定容至10 mL ↓ 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合:将海藻酸钠溶液冷却至室温后加入活化的酵母细胞,充分搅拌使其混合均匀,转移至注射器中 ↓ 固定化酵母细胞:以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加至配制好的CaCl2溶液中,形成凝胶珠,使其在溶液中浸泡30 min ↓ 冲洗:将固定
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