乳牛胎盘肽的制备及性状研究.pdfVIP

药物研究 CHNlAFOREGINMEDClALT—REATMENT—盔—圃誓幽 乳牛胎盘肽的制备及性状研究 郑长春 (吉林省磐石市医院 吉林磐石 132300) 【摘要】通过对牛胎盘肽的理化特，生物学活性及安全性检定，特别是与胸腺肽成分的比较结果，肽和氨基酸是主要的组成成分．其 中是携有调节机体免疫功能的信息的，而多种氨基酸也是人体所必需的。牛胎盘的综合利用大有可为前景看好 。 【关键词 l乳牛 胎盘肽 生物学活性 【中图分类号lR一332 【文献标识码lA 【文章编号】1674—0742(2009)12(e)一O113—02 1 材料与方法 烯酰胺凝胶电泳(SDS)方法 ，以胰岛素、蛋白酶抑制剂及核 1．1 材料 糖核酸酶等为标准曲线图。(3)游离氨基酸分析。应用国产氨基酸 自 (1)健康乳牛胎盘。由杭州四季青生物工程材料有限责任公司提 动分析仪，取 0．1％样品50ul进行分析。(4)多肽含量测定。采用 供，要求是足月产胎盘，低温冰冻保存。 Lowry氏法，具体按 《中国生物制品规程》2000年版的操作程序进 (2)胶体磨。国产，由吉林省西点药业科技发展股份有限公司协 行。(5)胎盘肽与胸腺肽性质比较。 助。 1．3．2 生物活性检定 (1)PHA(植物血凝素)皮试选择乙型肝 (3)超滤器及截留10000Da(分子量)的膜 ，由吉林省西点药业科技 炎患者20例，结核病患者2O名，年龄为l8～58岁之间，皮内注入PHA 发展股份有限公司提供。 试液0．1ml(20ug)，记录18-24h内结果，以≥10ram为阳性，然后给 (4)制备型离心机(5000rpm)，由吉林省西点药业科技发展股份有 予牛胎盘肽治疗，每人肌注lmg／支(约9rag多肽)，隔 日1次，共计3 限公司提供。 次 。末次注射后21d时，再行PHA皮试 ；(2)E一玫瑰花结试验(E— 1．2 制备工艺 RFC)。取猪胸腺分离出淋巴细胞，并经45~C水浴加热处理，使之脱受 (1)匀浆。将胎盘化冻，洗净(最后一遍用无菌用水)，剪碎，称重 ， 体 ，然后加入胎盘肽 ，3TC水浴作用2h后，加入新鲜且已洗净的绵羊 且按重量(kg)加入其2倍(立升)的无菌蒸馏水，上胶体磨进行研磨，收 红血球 ，再进行孵育。然后计算RFC花结数。 集匀浆液(此操作最好在万级室内进行)。(2)冻融。将上述匀浆液，先用 1．3．3 安全性检定 (1)过敏试验。取体重250～300g重的豚 lmol／L盐酸调pH至5．0±0．2，并适当分装在几个桶内，放入低温 鼠6只，每只豚鼠腹腔注射牛胎盘肽0．5mL，连续致敏3次 。末次注射 冰箱(～30～～40℃)冻结(最好能冻出花样凹凸出现)，后取出融化(可 后2周 ，再给lmL／只牛胎盘肽做发敏试验，观察30min。(2)热原试验。 置于25℃水浴中进行)。如此反复冻融3次。(3)加温变性。将上述经 按 《中国生物制品规程~2000年版有关方法进行。(3)急性毒力试验。 反复冻融后的匀浆液合并，并置于电加热水浴槽内。慢慢加热，60(2 取体重l8～25g重小白鼠15只，雌雄兼用 ，采用腹腔注射，最大剂量 时开始出现沉淀，其为变性蛋白，持续到80N85*2(，停止加温，恒温维 为lmL／只牛胎盘肽，相当于人用剂量的500倍左右，观察3d。(4)无菌 持15～20rain。后迅速降至室温。(4)离